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香菇源性成分探針?lè)晒舛?PCR 試劑盒

發(fā)布時(shí)間:2020/11/2 7:55:49      閱讀次數(shù):795

 

香菇源性成分探針?lè)晒舛?/font> PCR 試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)

本試劑盒可用于檢測(cè)食品或其他材料中是否有香菇的成分,F(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無(wú)法對(duì)食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測(cè)的快速靈敏的食材來(lái)源檢測(cè)技術(shù)將對(duì)食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù)探針?lè)?qPCR 原理開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品,它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板。

2. 根據(jù)香菇保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物和探針,能專一性地檢測(cè)出樣品中的香菇成分,但不能檢測(cè)其他非香菇成分。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 一管式閉管操作,降低了交叉污染。

5. 快速,整個(gè)檢測(cè)過(guò)程按一個(gè)樣品計(jì)所需時(shí)間僅為 2.0 小時(shí)。

6. 對(duì)混合樣品中香菇成分的檢測(cè)下限為 0.01%,對(duì)樣品中香菇成分的核酸檢測(cè)下限 0.1ng/µL

7. 本只能用于科研,足夠 50 次 20uL 體系的熒光定量 PCR。

規(guī)格及成分

 

成分

編號(hào)

十孔盒包裝

 

2×Probe qPCR MagicMix

190303

1 mL(棕色蓋)

熒光PCR 專用模板稀釋液

180701

1 mL(黃蓋)

香菇源性成分探針?lè)?qPCR

引物混合液

15-971yw

100 uL(白蓋)

香菇源性成分 qPCR 探針

15-971pb

50 uL(棕色管)

香菇源性成分探針?lè)?qPCR 陽(yáng)性

對(duì)照1×10E8 拷貝/uL

60908-502pc

50 uL(黃蓋)

天凈沙核酸釋放劑試用裝

61202

20 次(1mL,綠蓋)

使用手冊(cè)

15-971sc

1 份

運(yùn)輸及保存

低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較

高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

自備試劑

DNA 模板

香菇源性成分探針?lè)晒舛?/font> PCR 試劑盒使用方法

一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品 10E2-10E7 拷貝/μL  6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)

準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。

1.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭,下同。

3.  7 號(hào)管中加入 5  μL 陽(yáng)性對(duì)照濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分

 


 

 

預(yù)變性

95℃

15 min

 

PCR 反應(yīng)

(40 個(gè)循環(huán))

95℃

15sec

60℃

60sec(采集 FAM 通道的熒光信號(hào))

五、數(shù)據(jù)處理

11. 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè),則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 DNA 濃度的log 值,再推算出其濃度。

12. 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè),只判斷陽(yáng)性或陰性,則陰性對(duì)照 Ct 必須大于或等40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng),有典型擴(kuò)增曲線,Ct  值應(yīng)該小于或等于30。對(duì)待測(cè)樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則為陽(yáng)性。如果在 35-40 之間,則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于 40 則

為陰性,如果小于 40,則為陽(yáng)性。


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