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發(fā)布時間:2021/6/17 9:23:13 閱讀次數(shù):1131
細(xì)胞的染色一般是為了鑒定細(xì)胞,以下是細(xì)胞染色的方法和步驟:
HE染色
1. 脫蠟復(fù)水: 石蠟切片經(jīng)二甲苯Ⅰ、Ⅱ脫蠟各5min,然后放入100%、95%、90%、80%、70%各級酒精溶液中各3-5min,再放入蒸餾水中3min。
2. 染色:切片放入蘇木精中染色約10-30min。
3.水洗:用自來水流水沖洗約15min。使切片顏色變藍(lán)(或放入堿性水中也可),但要注意流水不能過大,以防切片脫落。
4.分化:將切片放入1%鹽酸乙醇液中褪色,約2秒至數(shù)十秒鐘。見切片變紅,顏色較淺即可。
5.漂洗:切片再放入自來水流水中使其恢復(fù)藍(lán)色。
6.脫水Ⅰ:切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各3-5min。
7、復(fù)染:用0.5%伊紅乙醇液對比染色1-3min。
8.脫水Ⅱ:將切片放入95%乙醇中洗去多余的紅色,然后放入無水乙醇中3-5min。最后用吸水紙吸干多余的乙醇。
9.透明:切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各3-5min。
10.封藏:中性樹膠封存
Giemsa染色
1.根據(jù)需要量,取8ml雙蒸水,加入姬姆薩原液1ml,再加入姬姆薩稀釋液1ml,再加入姬姆薩稀釋液1ml,混勻即為工作液,此工作液常溫可保存兩周。
2、按常規(guī)方法將石蠟切片脫蠟水化,PBS清洗。
3、將切片放到染色架上,滴加2-3滴染色工作液,使覆蓋全部組織,室溫染色15-30分鐘。
4、用自來水緩慢從玻片一端沖洗,晾干后鏡檢。
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