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土壤脲酶（S-UE）分光法試劑盒

發(fā)布時間：2022/8/8 12:16:34      閱讀次數(shù)：414

 土壤脲酶（S-UE）分光法試劑盒

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

貨號: YX-C-B933

規(guī)格: 50T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：甲苯 10mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×1 瓶，臨用前加入 20mL 蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存； 試劑三：液體 65mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四 A 液：液體 2mL×1 瓶，4℃保存；

  土壤脲酶（S-UE）分光法試劑盒

可見分光光度法


試劑四 B 液：液體 8mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將 A液倒入 B 液中混合，待用；未用完的液體

4℃保存一周。

試劑五：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；

標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支， 1mg/mL 氮標(biāo)準(zhǔn)液

產(chǎn)品說明：

S-UE 能夠水解尿素，產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。

本法以尿素為基質(zhì)，利用靛酚藍(lán)比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N，生成的藍(lán)色靛酚和氨的濃度成正比。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：

1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 630nm，蒸餾水調(diào)零

2、培養(yǎng)

試劑名稱

測定管

對照管

風(fēng)干土樣（g）

0.25

0.25

試劑一（μL）

125

125

振蕩混勻，使土樣全部濕潤，室溫放置 15min

試劑二（μL）

625

 

蒸餾水（μL）

 

625

試劑三（μL）

1250

1250

混勻，放入 37℃水浴培養(yǎng) 24h 后，10000g 常溫離心 10min，取上清液。


2、將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸餾水）若吸光值仍大于 1.5 繼續(xù)稀釋。

3、標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備：吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋至 10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。

4、測氨量

 

測定管

對照管

標(biāo)準(zhǔn)管

稀釋后的上清液或標(biāo)準(zhǔn)液

400

400

400

試劑四（μL）

80

80

80

試劑五（μL）

60

60

60

充分混勻，室溫放置 20min

蒸餾水（μL）

460

460

460

混勻，630nm 處蒸餾水調(diào)零，測 A 值，ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設(shè)一個對照管。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（y）和吸光度（x,減去濃度為 0 的空白管），做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

脲酶活力的計算：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA（x）帶入公式計算測定中樣品的濃度（μg/mL）y 值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個酶活力單位。

脲酶活力（U/g 土樣）＝y×10×V 反總÷W÷T=80×y

10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時間，1d；V 反總：反應(yīng)體系總體積：2mL；W：樣本質(zhì)量，0.25g。

  土壤脲酶（S-UE）分光法試劑盒


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