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發(fā)布時(shí)間:2024/9/11 8:56:51 閱讀次數(shù):173
心臟是循環(huán)系統(tǒng)的核心器官,負(fù)責(zé)泵送血液,為全身提供氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。心臟類器官是由干細(xì)胞或其他類型的細(xì)胞培養(yǎng)而成的三維結(jié)構(gòu),能夠表現(xiàn)出心臟的某些功能,如收縮、信號(hào)傳導(dǎo)等,它們不僅在形態(tài)上類似于心臟,還能在功能上模擬心臟的生理活動(dòng)。作為一種在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)的三維細(xì)胞結(jié)構(gòu),心臟類器官是近年來(lái)生物醫(yī)學(xué)研究中的重要進(jìn)展,能夠模擬心臟的生理特征,為心血管疾病的研究和藥物開發(fā)提供了新的平臺(tái)。
雅吉生物研制的hPSC誘導(dǎo)心臟類器官試劑盒能在體外短時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)生成類器官,并且生成的心臟類器官具有心肌細(xì)胞、心外膜細(xì)胞,成熟后的類器官有腔室結(jié)構(gòu),具有早期搏動(dòng)功能,能大大縮短心臟類器官的培養(yǎng)時(shí)間,加速研究效率,推進(jìn)對(duì)心臟類器官的探索。類器官作為目前研究的熱點(diǎn)受到了廣泛關(guān)注,而能誘導(dǎo)分化為類器官的人多能干細(xì)胞對(duì)類器官的發(fā)展及其重要。通過(guò)在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)人多能干細(xì)胞的生長(zhǎng)進(jìn)行調(diào)控,使其按受控的方向分化,并逐漸誘導(dǎo)分化成心臟類器官。隨著研究的深入,心臟類器官的誘導(dǎo)方法也越來(lái)越簡(jiǎn)潔,為心臟的相關(guān)研究創(chuàng)造了良好的科研環(huán)境。hPSC誘導(dǎo)心臟類器官試劑盒是專用于誘導(dǎo)人多能干細(xì)胞分化為心臟類器官的培養(yǎng)試劑盒,包含了適合心臟類器官生長(zhǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、誘導(dǎo)細(xì)胞分化所需的小分子和細(xì)胞因子,即買即用,不含動(dòng)物源成分。
(1)成分明確:不含血清,使用非動(dòng)物源的重組蛋白及小分子,短期內(nèi)即可在體外生成心臟類器官,生成的心臟類器官在分化后10-15天可觀察到早期搏動(dòng)。 (2)重復(fù)性好:規(guī)范操作可重復(fù)形成成熟心臟類器官。 分化第0天:基礎(chǔ)培養(yǎng)基1+補(bǔ)充劑A配成Ⅰ階段培養(yǎng)基。當(dāng)人多能干細(xì)胞匯合度達(dá)到75%-80%左右后消化,用Ⅰ階段培養(yǎng)基重懸為單細(xì)胞懸液,按每孔100 μL的體積將細(xì)胞懸液接種到96孔板中,1000rpm離心5min,然后將孔板轉(zhuǎn)移到37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24h。 分化第3天:吸棄培養(yǎng)基,將基礎(chǔ)培養(yǎng)基2和補(bǔ)充劑B配成Ⅱ階段培養(yǎng)基,每孔100 μL的體積將Ⅱ階段培養(yǎng)基加入孔中,連續(xù)培養(yǎng)2天。 第5天,將基礎(chǔ)培養(yǎng)基3與補(bǔ)充劑C充分混勻,配置成Ⅲ階段培養(yǎng)基,從孔中抽吸培養(yǎng)基,按每孔100 μL的體積將Ⅲ階段培養(yǎng)基加入孔中,連續(xù)培養(yǎng)2天。 第6天,從孔中抽吸培養(yǎng)基,按每孔100 μL的體積將成熟培養(yǎng)基加入孔中,開始長(zhǎng)期培養(yǎng),每2天換一次培養(yǎng)基。 心臟類器官將在分化后的10-15天開始跳動(dòng),進(jìn)一步培養(yǎng)后第19-21天取樣鑒定。
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