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發(fā)布時間:2018/6/29 16:00:49 閱讀次數(shù):1881
晨的風(fēng),驅(qū)逐煩躁的心情;清晨的霧,阻擋憂傷的腳步;清晨的露,譜寫快樂的音符;清晨的祝福,指引幸福的旅途,今天語純小編帶您了解了解鵝ELISA試劑盒的標(biāo)本如何處理.
鵝ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA).往預(yù)先包被鵝半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本 標(biāo)準(zhǔn)品 HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌.用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色.顏色的深淺和樣品中的鵝半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)呈正相關(guān).用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度.用于體外定量檢測血清 血漿 組織 細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中鵝半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)的含量.其標(biāo)本處理如下:
1 建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差.
2 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差.
3 請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本.
4 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出.
5 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本.
6 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài) 細(xì)胞數(shù)量 采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況.
7 實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對標(biāo)本進行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合鵝ELISA試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù).標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2).
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