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發(fā)布時間：2021/12/8 9:29:33 閱讀次數(shù)：1240
Mycoplasma國內(nèi)主要有三種譯名,醫(yī)學(xué)文獻譯為“支原體”（分枝原體,枝原體,類菌質(zhì)體）,動物醫(yī)學(xué)文獻譯為“霉形體”或“支原體”,臺灣 香港則譯為微漿菌.
支原體是目前已知一類能在無生命培養(yǎng)基上生長繁殖的最小的原核細胞型微生物.自然界分布廣泛,種類多,有80余種,分為兩個屬：一為支原體屬（Mycoplasma）,有幾十個種；另一為脲原體屬（Ureaplasma）,僅有一種.與人類感染有關(guān)的主要是肺炎支原體和解脲脲原體.
支原體無細胞壁,多呈不規(guī)則球狀 長絲狀,可分枝,營寄生共生或腐生.一般侵害對象為動植物,可造成多種疾病.
細胞培養(yǎng)（特別是傳代細胞）被支原體污染是個世界性問題.國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體：口腔支原體（M.orale） 精氨酸支原體（M.arginini） 豬鼻支原體（M.hyorhinis）和菜氏無膽甾原體（A.laidlawii）,為牛源性.國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體.
支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染 操作者本身的污染（某些支原體在人體是正常菌群） 培養(yǎng)基的污染 被污染細胞造成的交叉污染 實驗器材的污染 制備細胞的原始組織或器官的污染,等等.
體外生長的細胞對微生物及一些有害有毒物質(zhì)沒有抵抗能力,因此培養(yǎng)基應(yīng)達到無化學(xué)物質(zhì)污染 無微生物污染（如細菌 真菌 支原體 病毒等） 無其他對細胞產(chǎn)生損傷作用的生物活性物質(zhì)污染（如抗體 補體）.對于天然培養(yǎng)基,污染主要來源于取材過程及生物材料本身,應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格選材,嚴(yán)格操作.對于合成培養(yǎng)基,污染主要來源于配制過程,配制所用的水,器皿應(yīng)十分潔凈,配制后應(yīng)嚴(yán)格過濾除菌.
由于體外培養(yǎng)細胞自身沒有抵抗污染的能力,而且培養(yǎng)基中的抗生素抗污染能力有限,因而培養(yǎng)細胞一旦發(fā)生污染多數(shù)將無法挽回.支原體污染后,因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細胞手到多方面潛在影響,如引起細胞變形,影響DNA合成,抑制細胞生長等.
組織細胞培養(yǎng)工作中,可以從以下幾方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染；嚴(yán)格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基沖加入適量的抗生素.
抗生素主要用于消毒培養(yǎng)液,是培養(yǎng)過程中預(yù)防微生物污染的重要手段,也是微生物污染不嚴(yán)重時的“急救”方法.不同抗生素殺滅微生物不同,應(yīng)根據(jù)需要選擇.
在細胞培養(yǎng)過程中如果發(fā)現(xiàn)破碎的細胞甚多,培養(yǎng)細胞需要頻繁改善營養(yǎng)環(huán)境才能支持長期傳代培養(yǎng)時,應(yīng)該懷疑支原體污染.支原體污染難以觀察特殊的外觀變化,培養(yǎng)液也不渾濁.
支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有：抗生素處理 抗血清處理 抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理.要注意的是：支原體沒有細胞壁,故作用于細胞壁生物合成的抗生素,如內(nèi)酰胺類 萬古霉素等是不敏感的；對多粘菌素 利福平 磺胺藥物普遍耐火藥.對支原體最有抑制活性抗生素是四環(huán)素類 大環(huán)內(nèi)酯類等,氨基糖苷類 氯霉素對支原體有較小的抑制作用.必要時更換所有培養(yǎng)用物.通常,濾過除菌的方法對支原體是沒有作用的.
由于一些微生物,如支原體,病毒等能通過濾膜,所以過濾藥品仍潛在被外源微生物污染的危險,近年來,60Co輻射滅菌技術(shù)在醫(yī)藥 食品等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,由于輻射滅菌能夠徹底殺滅所有微生物.有試驗證實以2Mrad輻射處理的各培養(yǎng)基樣品達到了無菌要求,經(jīng)多批培養(yǎng)試驗,輻射滅菌安全可靠；輻射滅菌的培養(yǎng)基營養(yǎng)性能不低于過濾組,證明輻射滅菌對培養(yǎng)基性能無不良影響；對血清的輻射滅菌試驗效果也表明60COγ射線不影響培養(yǎng)效果.把干粉培養(yǎng)基經(jīng)無菌操做定量分裝于滅菌容器內(nèi),輻射后以干粉原型貯藏,不但培養(yǎng)基的純凈性得到保障,而且營養(yǎng)性能較過濾后以水溶液形式保存更穩(wěn)定,對谷氨酰胺等這類水溶液不穩(wěn)定者特別合適.
目前,有專門做支原體檢測的試劑盒,可以用細胞滴片檢測.市場上已有了新一代支原體抗生素M-Plasmocin（InvivoGen公司）,能有效的殺滅支原體,又不影響細胞本身的代謝,而且處理過的細胞不會重新感染支原體.另外,配合支原體檢測試劑盒（市場上有售,如美國ICN公司的產(chǎn)品）,可以幫助盡快發(fā)現(xiàn)支原體的污染.
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