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發(fā)布時間:2023/5/26 8:44:58 閱讀次數(shù):689
懸浮細胞HP-1的培養(yǎng)方法,培養(yǎng)條件:
RPMI-1640+10% FBS+0.05mM β-巰基乙醇+1% 雙抗 到貨處理 用75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部,觀察細胞生長情況. 1.不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞放入 37℃培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài). 2.通過離心的方式收集細胞,然后將細胞沉淀加入5-8ml的完全培養(yǎng)基輕輕吹打均勻后移入新的T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng). 懸浮細胞HP-1的培養(yǎng)方法,培養(yǎng)時的注意技巧 換液前將培養(yǎng)瓶豎在培養(yǎng)箱靜置1小時左右,輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基,然后加入3ml的新鮮完全培養(yǎng)基,混勻后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng). 2.如果細胞密度比較稀,培養(yǎng)基沒有明顯變化,可以加入500ul的FBS混勻后,豎著培養(yǎng). 3.傳代時,先按照換液步驟處理,吸掉3ml左右培養(yǎng)基后,加入10ml的新鮮完全培養(yǎng)基,混勻后分2個T25培養(yǎng)瓶培養(yǎng). 4.培養(yǎng)一周左右可以離心一次,以去除一些死細胞. 5.該細胞比較脆弱,培養(yǎng)過程中不要頻繁拿出來觀察,以免影響細胞的生長. 6.該細胞的生長環(huán)境比較敏感,需使用較好的血清培養(yǎng). 7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養(yǎng). 訂購建議: 為避免收到細胞后離心處理,推薦使用15ml離心管發(fā)貨, 到貨后直接分裝到2個T25培養(yǎng)瓶即可. 懸浮細胞HP-1的培養(yǎng)方法,
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