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發(fā)布時(shí)間:2023/6/5 11:54:39 閱讀次數(shù):886
UMNSAH/DF-1為什么總是有空泡?我們常會(huì)收到客戶反饋,我們養(yǎng)的UMNSAH/DF-1細(xì)胞總是有空泡,這個(gè)到底是什么原因呢?怎么導(dǎo)致的呢?
什么是空泡? 細(xì)胞中的空泡一般指在顯微鏡觀察,具有不同于細(xì)胞質(zhì)光學(xué)特征的泡狀物.
為什么我們培養(yǎng)其他的細(xì)胞很少出現(xiàn)這個(gè)現(xiàn)象,而這個(gè)細(xì)胞經(jīng)常會(huì)有呢?我們來了解一下這個(gè)細(xì)胞的特性.
細(xì)胞特性 正常的普通細(xì)胞都生長在37℃的環(huán)境中,但對于UMNSAH/DF-1細(xì)胞,最佳培養(yǎng)溫度為39℃,在低溫培養(yǎng)環(huán)境下就容易有空泡. 當(dāng)細(xì)胞溫度降低時(shí),細(xì)胞膜上磷脂分子的運(yùn)動(dòng)減慢,流動(dòng)性降低,從而降低了細(xì)胞膜對物質(zhì)的通透性,鈣離子內(nèi)流,從而導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)中色素堆積,形成空泡. 如圖:空泡狀態(tài)
收到貨后為什么會(huì)有空泡? 細(xì)胞在運(yùn)輸?shù)倪^程中,容易受到溫度 顛簸等影響,使細(xì)胞狀態(tài)以及形態(tài)會(huì)有所改變.
如何解決? 首先我們將培養(yǎng)箱的溫度調(diào)制39℃,將細(xì)胞放置4小時(shí)左右后,再進(jìn)行傳代或者換液處理,一般正常傳代后這種情況就會(huì)有所好轉(zhuǎn),細(xì)胞的空泡就會(huì)慢慢消失.
如圖:正常狀態(tài)
培養(yǎng)條件 DMEM+10%FBS+1%P/S 溫度39℃ ,空氣,95%;二氧化碳,5%
在培養(yǎng)過程中除了溫度會(huì)影響到細(xì)胞狀態(tài)以外,還有哪些因素會(huì)影響到細(xì)胞狀態(tài)? 細(xì)胞生長緩慢,可能是營養(yǎng)不夠,需要更換優(yōu)質(zhì)的血清 長時(shí)間不處理,導(dǎo)致細(xì)胞死亡,需及時(shí)更換新鮮的完全培養(yǎng)基 細(xì)胞密度過高,導(dǎo)致細(xì)胞擠壓,死細(xì)胞增多,需要及時(shí)傳代 操作不當(dāng),消化過度或者過度吹打等,需嚴(yán)格遵守操作注意事項(xiàng) 細(xì)胞污染,導(dǎo)致生長緩慢,狀態(tài)變差,或者直接死亡,需及時(shí)清除污染
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