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炭疽芽孢桿菌PCR試劑盒

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產(chǎn)品及特點(diǎn)

炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis) 屬于芽孢桿菌屬,是引起某些家畜、野獸和人類炭疽。ㄈ诵蠊不迹┑牟≡。發(fā)病率最高的是牛羊,豬也可發(fā)生,人常因屠宰、食用或與病死畜接觸而感染。炭疽桿菌對社會公共衛(wèi)生和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的危害,迄今仍占相當(dāng)大的比重。由該菌引起的炭疽病幾乎遍及世界各地,四季均可發(fā)生,因此快速檢測炭疽芽孢桿菌具有重要意義。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開發(fā),它具有下列特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供細(xì)菌DNA模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增炭疽芽孢桿菌。

3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。

5. 試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研

 

規(guī)格及成分

成  份

編號

十孔包裝

PCR MagicMix 3.0

90805

1 mL(亮黃蓋

超純水

100935

1 mL(藍(lán)色)

炭疽芽孢桿菌PCR引物混合液

13-25410yw

100 μL(白

炭疽芽孢桿菌PCR陽性對照

13-25410pc

100 μL(黃

天凈沙DNA釋放劑試用裝

130982

50次(試用裝)

使用手冊

13-25410sc

1份

 

 

運(yùn)輸及保存

低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。

 

自備試劑

樣品DNA。

 

使用方法

一、樣品DNA的制備

1. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC樣品制備陰性對照)?梢杂10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。

2. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)細(xì)菌DNA提取試劑盒兼容。也可以選購本公司的細(xì)菌DNAout細(xì)菌DNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送50次免DNA提取的天凈沙DNA釋放劑,本產(chǎn)品的裂解液可以直接作為PCR模板,省略了DNA提取步驟。

二、設(shè)置PCR反應(yīng)(40 μL體系)

3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

成分

N+2

樣品

PCR陰性對照

PCR陽性對照

PCR MagicMix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

炭疽芽孢桿菌 PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

N+2個樣品DNA模板

各18 μL

-

-

樣品制備陰性對照

-

18 μL

-

樣品制備陽性對照

-

-

18 μL

4. 下表設(shè)置PCR反應(yīng):

過程

溫度

時間

預(yù)變性

94

5 min

PCR反應(yīng)

(35個循環(huán))

94

20 sec

50

20 sec

72℃

30 sec

最后延伸

72

10 min

三、電泳檢測

5. 取10-20 μL PCR產(chǎn)物。電泳檢測PCR產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的PCR Mix在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加loading buffer。預(yù)期的PCR產(chǎn)物長度為208bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí)驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋10倍后重復(fù)PCR擴(kuò)增以排除PCR抑制劑的感染。

 

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品

炭疽芽孢桿菌可視化LAMP擴(kuò)增試劑盒

 

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