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四環(huán)素類快速檢測卡

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 1 原理及用途

本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測魚蝦組織、水樣等樣品中的四環(huán)素類

樣本溶液滴入金標(biāo)微孔后,樣本溶液中的四環(huán)素類與金標(biāo)抗體相結(jié)合,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上四環(huán)素類偶聯(lián)物結(jié)合。

2 技術(shù)指標(biāo)

2.1樣本檢測下限       

    四環(huán)素類(顯性)………………1ppb(ng/ml)

    四環(huán)素類(隱性)………………1ppb(ng/ml)

3 試劑盒組成

序號

名稱

20T/盒

10T/盒

1.

檢測卡(含金標(biāo)微孔)

20個

10個

2.

提取劑1

1瓶

1瓶

3

試劑1

1瓶

    1瓶

4.

氧化劑

1瓶

1瓶

5.

MG復(fù)溶液

1瓶

1瓶

6.

說明書

1份

1份

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器:均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)

4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl

4.3 試劑:乙腈

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知:

實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

5.2 配液:無

5.3 樣本前處理步驟:

5.3.1 水樣

1)取60ul待檢水樣品與60ul復(fù)溶液混勻,備用。

5.3.2 魚蝦組織

(建議蝦要去掉頭和殼后徹底清洗干凈,魚要去鱗后取魚背部油脂較少的部位進(jìn)行實(shí)驗(yàn),樣本應(yīng)當(dāng)避光冷藏保存)

1)取切碎的一定量的去脂肪組織樣本,用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)(剪刀剪碎);

2)稱取 4g±0.1g均質(zhì)物于配套15ml離心管中;

3)向上述離心管中加入2ml 試劑1溶液,劇烈振蕩2min,依次加入提取劑1溶液150ul,乙腈溶液4ml,擰緊蓋帽劇烈振蕩2min,室溫下4000 r/min 離心5min;

4)此時離心管底部為組織樣本均質(zhì)物,移取上層清液2ml于5ml離心管中,加入100ul氧化劑,平行輕搖混勻30秒,65℃下,利用氮吹儀或吹風(fēng)機(jī)吹干。

5)向吹干的離心管中加入0.3mlMG復(fù)溶液,反復(fù)吹打1min,充分復(fù)溶離心管底部及內(nèi)壁固體殘留物,吸取120ul(約4-5滴)溶液,此溶液為待檢液。

6 實(shí)驗(yàn)步驟

6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出試劑板,放于平整、潔凈的臺面上。

6.2 取已準(zhǔn)備好的待測樣本溶液120ul(5-6滴)加入到金標(biāo)微孔中,等待反應(yīng)2分鐘后,用滴管吹打至完全溶解孔內(nèi)紫紅色物質(zhì),再等待2分鐘,吸取孔內(nèi)90ul(4-5滴)溶液滴加到加樣孔中,加樣后開始計時;

6.3 按室溫下放置5-8分鐘判斷結(jié)果,30分鐘后結(jié)果判讀無效。

7 結(jié)果判斷

陰性(-):在檢測窗內(nèi),對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)顯色與對照線一致或更深,表明樣本中四環(huán)素類殘留濃度低于1ppb或無四環(huán)素類殘留。

陽性(+):在檢測窗內(nèi),對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)不顯色或比對照線淺(備注:5分鐘后,T線明顯顯綠色的可判定為陽性),表明樣本中四環(huán)素類殘留濃度高于1ppb。

無效:在檢測窗內(nèi),對照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。

8 注意事項(xiàng)

8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。

8.2 檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。

8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。

8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。

8.5 待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異,F(xiàn)象,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。

9 貯藏及保存期

儲藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。

質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

 

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