柱式 RNA 純化試劑盒用于純化并回收體外轉(zhuǎn)錄得到的 RNA 分子和從各種材料中提取得到的總RNA,能有效地去除 RNA 樣品中污染的雜質(zhì)。它具有下列特點:
1. 可以回收 20 nt 以上的 RNA。
2. 操作簡單快速,只需要 5 分鐘。
3. 回收率高達(dá) 80%以上。
4. 一站式,即開即用,操作簡單,用戶不需要自備任何試劑。
5. 得到的 RNA 純度一般都在 1.9 以上,可以用于各種后續(xù)實驗。
使用方法
1. 在 RNA 溶液中加入 9 倍體積的柱式 RNA 純化溶液 A,顛倒數(shù)次充分混勻。注意:如果在 1.5mL 塑料離心管中操作,RNA 溶液的體積不要超過 150uL,否則加入 9
倍體積的溶液 A 后,體積不夠。另外,由于會因為非特異性吸附等原因,整個操作會丟失一定量的 RNA,所以 RNA 的起始總量不能低于 5ug。如果低于 5ug 最好加
入 5ug 的載體 RNA(如酵母 tRNA 等)。
2. 根據(jù)最后體積多少分一次或兩次上柱,即將混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。每次轉(zhuǎn)移后 12000 g 室溫離心半分鐘并保留穿透液(待確認(rèn) RNA 回收成功后再棄之)。
3. 加 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12000 g 室溫離心半分鐘并棄穿透液。
4. 再加 0.3mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12000 g 室溫離心半分鐘并棄穿透液。
5. 干甩半分鐘,即將空離心吸附柱和套管 12000 g 室溫離心半分鐘。
6. 加 30-100 uL RNA 洗脫液到離心吸附柱中,12000 g 室溫離心半分鐘即得回收的RNA。
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