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RNALater™血液RNA穩(wěn)定保存液

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 RNALater™血液RNA穩(wěn)定保存液(RNALater™ RNA Stabilization Reagent for Blood),簡稱血液RNALater™或血液RNALater™試劑,是一種用于采集血液樣品時,僅需室溫操作,即可迅速抑制RNase并穩(wěn)定保存血液樣品中RNA的無毒無害液態(tài)試劑。本產(chǎn)品廣泛用于新鮮血液樣品中RNA的穩(wěn)定保存。

本產(chǎn)品的使用效果和液氮凍存的效果一致。本產(chǎn)品可以迅速滲透到血液細(xì)胞內(nèi)部,完全抑制RNase,避免RNA降解,保持血液樣品RNA的完整性,從而完美保存血液細(xì)胞的基因表達(dá)譜和細(xì)胞外的RNA譜,并且和液氮一樣可以長期保存樣品中的RNA。

本產(chǎn)品安全便捷。本產(chǎn)品無任何毒性和刺激性,可室溫使用,確保了使用時的安全和便捷。和使用液氮相比,可以有效避免因使用超低溫的液氮而可能引起的凍傷、離心管爆裂等安全隱患,并且攜帶、運(yùn)輸非常方便。

本產(chǎn)品可穩(wěn)定血液樣品的RNA表達(dá)譜。常見的血液樣品保存方式是4℃短時間保存,但此時血液中細(xì)胞的生命活動還在進(jìn)行,基因表達(dá)譜還會發(fā)生變化,RNA提取時與血液樣品收集時的基因表達(dá)譜很可能已經(jīng)出現(xiàn)顯著差異,這種顯著的差異很可能會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不確定性。而使用血液RNALater™試劑保存后,血液中細(xì)胞的生命活動幾乎立即被終止,RNA譜也被固定,且RNA完整性更佳(圖1B)。經(jīng)測試,直接將全血置于-80℃條件下保存會導(dǎo)致部分RNA降解(圖1B),可能原因是在凍存和解凍過程中細(xì)胞受到破壞,細(xì)胞內(nèi)的RNase釋放而導(dǎo)致部分RNA降解。因此,不建議直接將全血置于-80℃條件下保存。

本產(chǎn)品適用于普通新鮮血液樣品中RNA的穩(wěn)定和保存,更加適合樣品收集后不能夠立即進(jìn)行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情況,特別適用于野外或臨床采集的樣品、大批量采集的血液樣品和不能立即凍存的血液樣品RNA的穩(wěn)定與保存。

在本產(chǎn)品中樣品的保存時間和存儲溫度相關(guān),例如37℃可保存1-2天,室溫可保存一周,4℃可以保存1個月,-20℃或更低溫度可以更長時間保存。具體如下表所示:

存儲溫度 37℃ 25℃ 4℃ -20℃或更低溫度
保存時間 1-2天 1周 1個月 >6個月

抽提得到的病毒RNA可用于反轉(zhuǎn)錄、RT-PCR、qPCR、Northern、點(diǎn)雜交(Dot Blot)、純化mRNA、體外翻譯、RNase protection30 assay、cDNA克隆等下游實(shí)驗(yàn);也可用于基因表達(dá)芯片分析(microarray)、高通量測序(high throughput sequencing)等對RNA質(zhì)量要求較高的情況。

本產(chǎn)品對于小鼠血液樣品的保存效果如圖1所示。全血樣品用本產(chǎn)品分別在4℃分保存30天、室溫保存7天以及37℃保存1天后,抽提獲得的RNA與新鮮樣品(Control, ctrl)一樣均能夠保持完整性,幾乎無降解;而直接將血液在25℃保存7天,大部分RNA都已經(jīng)被降解(圖1A)。在4℃條件下保存,血液RNALater™試劑的保護(hù)效果更好;而直接將全血置于-80℃條件下保存,3天時RNA已有部分降解,但血液RNALater™試劑保護(hù)的樣品幾乎無降解。

圖1. RNALater™血液RNA穩(wěn)定保存液對于小鼠全血中RNA的穩(wěn)定保存效果圖。按照圖中所示條件保存后,使用RNAeasy™動物RNA抽提試劑盒(離心柱式) (R0024/R0026/R0027)抽提RNA,隨后取相同體積的RNA樣品進(jìn)行電泳。其中圖A為RNA樣品變性處理后,在含6.67%甲醛和適量NA-Red (D0128)的1%變性瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳檢測,圖B為含NA-Red (D0128)的1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。本圖僅供參考。

本產(chǎn)品也可用于血液樣品中蛋白和DNA的穩(wěn)定和保存,但血液RNALater™試劑會導(dǎo)致蛋白變性,后續(xù)可進(jìn)行Western blot、SDS-PAGE等實(shí)驗(yàn),而不適用于檢測酶活力等須保持蛋白活性的實(shí)驗(yàn)。

按照每200µl血液樣品使用1ml本產(chǎn)品來計算,本產(chǎn)品100ml包裝可以用于約100份血液樣品的保存, 500ml包裝可以用于約500份血液樣品的保存。

包裝清單:

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
R0116-100ml RNALater™血液RNA穩(wěn)定保存液 100ml
R0116-500ml RNALater™血液RNA穩(wěn)定保存液 500ml
說明書 1份

保存條件:

室溫或4℃保存,兩年有效。

注意事項(xiàng):

本產(chǎn)品適合新鮮血液的保存,血液樣品獲得后需要盡快使用本產(chǎn)品保存。

樣品如果需要-20℃或-80℃長期保存,應(yīng)先置于4℃保存過夜或更長時間后才能再轉(zhuǎn)移至-20℃或-80℃保存,以保證血液RNALater™試劑充分有效地完全滲透血液細(xì)胞內(nèi)部。

-20℃或-80℃保存情況下,樣品解凍時血液RNALater™試劑中可能有結(jié)晶析出,屬正,F(xiàn)象,可待結(jié)晶完全溶解后使用,不會影響后續(xù)RNA的抽提效果。

所有自行準(zhǔn)備的試劑和耗材也都應(yīng)是RNase-free。如果可能有RNase污染,可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后高溫高壓滅菌并烘干。操作時應(yīng)避免對著樣品或所使用的試劑盒耗材呼氣或說話,以防RNase污染。建議戴一次性口罩操作。

對于操作環(huán)境中RNA酶的去除,推薦使用生產(chǎn)的RNase and DNase Away (R0123)以去除實(shí)驗(yàn)桌面上或其它接觸面上的RNase。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 
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