ER-Tracker Red是一種具有細(xì)胞膜通透性的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum, ER)紅色熒光探針，對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有高度選擇性，可以用于活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性熒光染色。

ER-Tracker Red為采用Molecular Probes公司的BODIPY TR進(jìn)行了熒光標(biāo)記的glibenclamide。Glibenclamide即glyburide，中文名為格列苯脲，是一種2型糖尿病治療藥物，可以結(jié)合主要定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的包含ATP敏感的鉀離子通道(KATP channel)的磺脲類(sulphonylurea)受體。因此熒光標(biāo)記的glibenclamide就可以用作內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性的熒光探針。ER-Tracker Red適用于活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色，但不適合用于固定細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色。
ER-Tracker Red的分子式為C44H42BClF2N6O7S2，分子量為915.23，ER-Tracker Red的化學(xué)結(jié)構(gòu)式參考圖1。
圖1.ER-Tracker Red的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。ER-Tracker Red對(duì)于細(xì)胞的毒性極低。而傳統(tǒng)的DiOC6(3)對(duì)ER染色的同時(shí)也對(duì)細(xì)胞有一定的毒性。
ER-Tracker Red呈紅色熒光，檢測(cè)時(shí)的最大激發(fā)波長(zhǎng)為587nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為615nm。ER-Tracker Red的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考圖2。
圖2.ER-Tracker Red的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。ER-Tracker Red按照后附的使用說明染色后，用甲醛等固定后染色效果可以被部分保留。ER-Tracker Red在活細(xì)胞中的染色效果參考圖2。
圖3.ER-Tracker Red在HeLa細(xì)胞中的染色效果。Hoechst 33342染色的HeLa細(xì)胞其細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色熒光； ER-Tracker Red染色的HeLa細(xì)胞其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈現(xiàn)紅色熒光。
提供了ER-Tracker Red 稀釋液，使ER-Tracker Red的使用更加便捷。
按照1:1000的比例稀釋，可以配制20ml ER-Tracker Red工作液；按照1:3000的比例稀釋，可以配制60ml ER-TrackerRed工作液。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存，半年有效。ER-Tracker Red需-20℃避光保存。
注意事項(xiàng)：
ER-Tracker Red(1mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。對(duì)于微量的液體，每次使用前先離心數(shù)秒鐘，使液體充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
需自備蓋玻片和載玻片
格列本脲的藥理學(xué)活性可能會(huì)影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的一些功能；某些特殊細(xì)胞中磺脲類受體的可變表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致非內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性染色。
ER-Tracker Red適用于活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色，但不適合用于固定細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色。如果經(jīng)ER-Tracker Red染色后的細(xì)胞需要進(jìn)行固定操作，使用4%多聚甲醛在37℃固定2分鐘。
ER-Tracker Red染色后的細(xì)胞不能用Triton X-100通透，Triton X-100通透處理會(huì)導(dǎo)致ER-Tracker Red的熒光染色消失。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明：
1.ER-Tracker Red工作液的配制：
a.取少量ER-Tracker Red按照1:1000的比例加入到ER-Tracker Red 稀釋液中。例如取1μl ER-Tracker Red加入到1ml ER-Tracker Red 稀釋液中。混勻后即為ER-Tracker Red工作液。
b.ER-Tracker Red工作液使用前需37℃預(yù)溫育。
注：工作液中ER-Tracker Red的濃度可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，推薦的稀釋比例調(diào)整范圍為1:1000-1:3000。為降低背景，在染色效果可以接受的范圍內(nèi)，建議盡量使用較低濃度的ER-Tracker Red。
2.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光標(biāo)記：
a.去除細(xì)胞培養(yǎng)液，用適量的溶液如HBSS with Ca2+ & Mg2+ (Hanks' Balanced Salt Solution with Ca2+ & Mg2+)洗滌生長(zhǎng)在蓋玻片上的細(xì)胞。注：HBSS with Ca2+ & Mg2+ (C0219)可以向公司訂購；對(duì)于懸浮細(xì)胞的染色可以參考貼壁細(xì)胞的染色方法進(jìn)行。
b.去除洗滌液，加入步驟1配制好的并37℃預(yù)溫育的ER-Tracker Red染色工作液，與細(xì)胞37℃共孵育15-30分鐘。
c.去除ER-Tracker Red染色工作液，用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞1-2次。
d.隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察。此時(shí)可觀察到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈明亮的強(qiáng)熒光染色。
e.如果經(jīng)ER-Tracker Red染色后的細(xì)胞需要進(jìn)行固定，可以使用4%甲醛37℃固定2分鐘。固定后用適當(dāng)?shù)南礈煲合礈?-3次，每次5分鐘，隨后可以進(jìn)行復(fù)染或滴加適當(dāng)?shù)目篃晒獯銣绶馄�液，最后封片觀察。注意：ER-Tracker Red染色的細(xì)胞不能用Triton X-100通透，Triton X-100通透處理會(huì)導(dǎo)致ER-Tracker Red的熒光染色消失。​