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Golgi-Tracker Red (高爾基體紅色熒光探針)

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 Golgi-Tracker Red是一種高爾基體紅色熒光探針,是神經(jīng)鞘脂(sphingolipid)類熒光探針中的一種,可以用于活細(xì)胞高爾基體特異性熒光染色。

Golgi-Tracker Red為采用Molecular Probes公司的BODIPY TR進(jìn)行了熒光標(biāo)記的C5-ceramide。Ceramide或其類似物可以選擇性地和高爾基體結(jié)合,因此熒光標(biāo)記的ceramide可以用作高爾基體特異性的熒光探針。Golgi-Tracker Red可以用于活細(xì)胞的高爾基體熒光標(biāo)記,但不適合用于固定細(xì)胞的標(biāo)記。Golgi-Tracker Red的化學(xué)結(jié)構(gòu)式參考圖1。
圖1.Golgi-Tracker Red的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。Golgi-Tracker Red分子式為C39H50BF2N3O4S,分子量為705.71,呈紅色熒光,最大激發(fā)波長為589nm,最大發(fā)射波長為617nm。Golgi-Tracker Red的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考圖2。
圖2. Golgi-Tracker Red的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。Golgi-Tracker Red常用于活細(xì)胞的脂類運輸和代謝研究,相比較于傳統(tǒng)的同類型探針NBD C6-ceramide,其呈現(xiàn)出更高的摩爾吸光系數(shù)和光量子產(chǎn)量,且光穩(wěn)定性更強。除了以上應(yīng)用,本探針還可用來測定Schwann細(xì)胞內(nèi)脂類合成的速率,以及標(biāo)記細(xì)胞輪廓以便于共聚焦顯微鏡下觀察形態(tài)運動。
本Golgi-Tracker Red探針已與BSA形成復(fù)合物。本產(chǎn)品所屬的神經(jīng)鞘脂類熒光探針與BSA形成復(fù)合物后,對活細(xì)胞高爾基體的標(biāo)記會更加高效。
本試劑盒提供了Golgi-Tracker Red稀釋液,使Golgi-Tracker Red的使用更加便捷。
按照1:100的比例稀釋,可以配制3ml Golgi-Tracker Red工作液;按照1:200的比例稀釋,可以配制6ml Golgi-Tracker Red工作液。
包裝清單:

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
C1043-1 Golgi-Tracker Red (33.3mg/ml, 30µl) 1mg
C1043-2 Golgi-Tracker Red稀釋液 6ml
說明書 1份

保存條件:
-20℃保存,半年有效。Golgi-Tracker Red需-20℃避光保存。
注意事項:
對于微量的液體,每次使用前先離心數(shù)秒鐘,使液體充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
需自備蓋玻片和載玻片
Golgi-Tracker Red可以用于活細(xì)胞的高爾基體熒光標(biāo)記,但不適合用于固定細(xì)胞高爾基體的熒光標(biāo)記。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明:
1.Golgi-Tracker Red工作液的配制:
a.取少量Golgi-Tracker Red按照1:100的比例加入到Golgi-Tracker Red稀釋液中。例如取10µl Golgi-Tracker Red加入到1ml Golgi-Tracker Red稀釋液中;靹蚝蠹礊镚olgi-Tracker Red工作液。
注:工作液中Golgi-Tracker Red的濃度可以根據(jù)實際情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,推薦的稀釋比例調(diào)整范圍為1:50-1:200。
b.Golgi-Tracker Red工作液可以在首次使用后回收保存于4℃或-20℃,并重復(fù)使用。1-2天內(nèi)可以4℃保存,更長時間則需-20℃保存。使用至達(dá)不到預(yù)期效果時可以廢棄。
2.活細(xì)胞高爾基體的熒光標(biāo)記:
a.去除細(xì)胞培養(yǎng)液,用適量的溶液如HBSS with Ca2+ & Mg2+ (Hanks' Balanced Salt Solution with Ca2+ & Mg2+)洗滌生長在蓋玻片上的細(xì)胞。注:HBSS with Ca2+ & Mg2+ (C0219);對于懸浮細(xì)胞的染色可以參考貼壁細(xì)胞的染色方法進(jìn)行。
b.去除洗滌液,加入步驟1配制好的Golgi-Tracker Red染色工作液,與細(xì)胞4℃共孵育30分鐘。
c.回收Golgi-Tracker Red染色工作液,用冰浴預(yù)冷的細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞3次左右,換新鮮培養(yǎng)液37℃孵育30分鐘。
d.用新鮮培養(yǎng)液再洗滌一次,隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察。此時可觀察到高爾基體呈明亮的強熒光染色,而細(xì)胞內(nèi)的其他膜系統(tǒng)呈比較微弱的熒光染色。​​


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