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Actin-Tracker Green (微絲綠色熒光探針)

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Actin-Tracker Green是一種Actin綠色熒光探針,可以用于培養(yǎng)細(xì)胞或組織切片的Actin特異性熒光染色。
Actin-Tracker Green探針為熒光染料FITC標(biāo)記的毒蕈肽(phalloidin),即phalloidin-FITC,其分子量約為1251.4,最大激發(fā)波長為496nm,最大發(fā)射波長為516nm。
本產(chǎn)品可以用于細(xì)胞或組織內(nèi)的微絲(microfilament)的熒光檢測。HeLa細(xì)胞使用本產(chǎn)品染色的效果參見圖1。


圖1. HeLa細(xì)胞使用本產(chǎn)品的染色效果圖。圖中可見微絲的綠色細(xì)絲狀形態(tài)的染色。圖中的染色實(shí)驗(yàn)在六孔板中進(jìn)行,Actin-Tracker Green的稀釋比例為1:100。本圖僅作參考,不同的樣品不同的檢測條件,實(shí)際獲得的結(jié)果可能有所差別。

本產(chǎn)品使用時的推薦稀釋比例為1:40-1:200。如果每個片子需要使用200μl染色工作液,每個包裝的本產(chǎn)品足夠用于40-200個片子的染色。
包裝清單:

產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
C1033 Actin-Tracker Green 0.2ml
說明書 1份

保存條件:
-20℃避光保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
為避免反復(fù)凍融,建議適當(dāng)分裝。
對于微量的液體,每次使用前先離心數(shù)秒鐘,使液體充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
需自備蓋玻片和載玻片(可以向雅吉訂購)。
Phalloidin 有一定毒性(LD50為2mg/kg體重),1ml Actin-Tracker Green中的phalloidin少于0.2mg,使用時請注意適當(dāng)防護(hù)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

使用說明:
1. 固定細(xì)胞或組織切片的熒光染色:
a. 用PBS洗滌細(xì)胞或組織切片2次。
b. 用雅吉的免疫染色固定液(P0098)或PBS配制的3.7%甲醛溶液室溫固定細(xì)胞或組織切片約10分鐘。注意:甲醇可以破壞actin蛋白,因此不能使用含有甲醇的固定液。并且盡量使用不含甲醇的甲醛。
c. 用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗滌2-4次,每次約5分鐘。
d. 用雅吉的免疫熒光染色二抗稀釋液(P0108)或含有1-5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS按照1:40-1:200的比例稀釋Actin-Tracker Green,例如5μl或25μl Actin-Tracker Green用1ml稀釋液稀釋,稀釋后的溶液即為Actin-Tracker Green染色工作液。注:稀釋比例可以根據(jù)實(shí)際染色效果進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
e. 把Actin-Tracker Green染色工作液按照每個片子約200μl的比例滴加到片子上,室溫避光孵育20-60分鐘。為防止蒸發(fā),孵育時最好將片子置于載玻片染色盒中,載玻片染色盒(FSR958)可以向雅吉訂購。
f. 用雅吉的免疫染色洗滌液(P0106)或含0.1% Triton X-100的PBS洗2-4次,每次約5分鐘。
g. 隨后可以直接用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。為長期保存,可以在片子自然干燥后封片并于4℃避光保存,保存時間可長達(dá)6個月左右。
2. 對于活細(xì)胞的熒光染色:
Phalloidin通常不具有細(xì)胞通透性,因此極少用于活細(xì)胞染色。但也有報道活細(xì)胞可被標(biāo)記,可能是通過細(xì)胞的吞噬作用進(jìn)入了某些細(xì)胞。一般對于活細(xì)胞的染色需要更多的染料。

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