本試劑盒是結(jié)合植物葉綠體純化試劑盒和柱式植物DNA抽提試劑盒而推出的新興產(chǎn)品,專門用于植物葉綠體DNA的快速提取。它具有下列特點(diǎn):
1. 純度高,不含污染和抑制劑,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis等各種后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
2. 產(chǎn)率一般在3-30 ug/100 mg樣品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段長(zhǎng)度一般在40-50 Kb左右。
3. 本產(chǎn)品足夠15次提取,每次可處理30g葉片。
4. 已經(jīng)成功用于菠菜,大豆,萵筍,白菜,煙草和甜菜等雙子葉植物,也適用于單子葉等其他植物(可能需要優(yōu)化條件)。
5. 不會(huì)發(fā)生離心柱堵塞現(xiàn)象。
6. 價(jià)廉物美,與國(guó)外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價(jià)格便宜。
用本品(2、3)和國(guó)外某公司同類產(chǎn)品(1)從30g 新鮮菠菜葉片中提取葉綠體DNA,最后取5 uL(總體積70 uL)進(jìn)行電泳。電泳染料為綠如藍(lán),電泳緩沖液為SuperBuffer-2超快 電泳液。
植物葉綠體基因組特點(diǎn)
葉綠體基因組DNA(Chloroplast DNA,cpDNA)一般為雙鏈環(huán)狀分子,只有極少數(shù)為線性分子。目前研究表明,葉綠體基因組的結(jié)構(gòu)十分保守,一般由四個(gè)基本部位組成分別是兩個(gè)反向重復(fù)序列(IR),一個(gè)短單拷貝序列(short single copy seguence, SSC)和一個(gè)長(zhǎng)單拷貝序列(long single copy seguence, LSC)。葉綠體基因組特點(diǎn)有:
1. 環(huán)狀雙螺旋分子,不與蛋白質(zhì)結(jié)合。
2. 基因組遺傳和復(fù)制復(fù)雜且難以確定。
3. 基因組大小在120kb-160kb,含120-140個(gè)基因。
4. 某些基因含有內(nèi)含子。
5. 有些基因組合可以形成操縱子。
所帶基因主要控制rRNA,tRNA及約80種蛋白合成