由于土壤中有機(jī)質(zhì)含量豐富,尤其是其中的腐殖酸對PCR等后續(xù)反應(yīng)有極大的抑制作用,所以從土壤微生物提取高純度的DNA一直是十分棘手的問題。本產(chǎn)品是精心優(yōu)化的專門用于從各種土壤樣品和河海沉積物中提取高質(zhì)量的DNA的試劑。
1. 去污染效果好,對大多數(shù)土壤樣品,OD260/280一般都在1.8以上。
2. 產(chǎn)量高,每克土壤一般可以提取到5-50 μg DNA,片段長度在20-50 Kb。
3. 操作過程簡單快速,只需要30分鐘,擴(kuò)容性好。
DNA樣品原液或稀釋100倍左右可以直接用于PCR等后續(xù)反應(yīng)。
將0.1-0.3克左右的土壤與0.5 μL溶液A混合,劇烈振蕩5-10分鐘,65℃保溫5分鐘,離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入0.5 μL溶液B,冰浴5 分鐘,離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入0.2 μL氯仿,振蕩30秒混勻,離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入2倍體積的乙醇,混勻后離心10分鐘,棄上清,1 mL 75%乙醇洗兩次即得DNA。
用本產(chǎn)品分別提取河流沉積物(1 號)和草坪土壤(2號)各0.3 g,DNA 最后溶解在50 μL TE中,取10 μL進(jìn)行電泳。M為全長的λDNA。電壓為300 V,電泳時間為10分鐘,電泳緩沖液為1×SuperBuffer-2。