本產(chǎn)品是在本公司柱式土壤DNAOUT(CAT#:71205-50)基礎(chǔ)上開發(fā)而得的 大提升級(jí)產(chǎn)品,用于從各種土壤樣品和河海沉積物中大量提取高質(zhì)量的DNA的試劑。跟柱式土壤DNAOUT相比它具有下列特點(diǎn):
1. 處理量大,一次最多可以處理20克的土壤樣品。
2. 去污染效果更好,得到的DNA可以直接作為PCR模板或酶切,不需要再進(jìn)行去腐殖酸處理。
3. 操作過程更加簡單快速,整個(gè)操作只需要10多分鐘,擴(kuò)容性好。
4. 產(chǎn)量高,每克土壤一般可以提取到5-50 μg DNA,片段長度在20-50 Kb, OD260/280一般都在1.8以上。
5. 適合于各種土壤(包括河海沉積物)。
使用及效果
將3-20克的土壤與10 mL溶液A在自備50 mL塑料離心管中劇烈振蕩5-10分鐘后,65℃保溫5分鐘,離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的自備50 mL塑料離心管中, 加入等體積溶液B,混勻后冰浴5分鐘,離心2分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到新的自備50 mL塑料離心管中,加入1.5倍體積的溶液C,混勻后轉(zhuǎn)移到大提離心吸附柱中,離心5分鐘,棄穿透液,用10 mL通用洗柱液洗兩次,干甩后用0.5-1 mL DNA洗脫液即得DNA。
用本產(chǎn)品提取的5 g 花坪土壤的DNA。每次洗脫體積均為1 mL。上樣體積為15 μL,最后在0.8% 瓊脂糖凝膠中電泳后紫外觀察。使用的染料為綠如藍(lán)染料,電泳緩沖液為超快電泳液( 實(shí)驗(yàn)編號(hào):305067)。