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柱式BAC DNAOUT

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一般而言，使用硅膠柱純化質(zhì)粒時(shí)，只能純化小于30 Kb以下的質(zhì)粒載體，大

于30 Kb質(zhì)粒因牢牢結(jié)合在硅膠基質(zhì)中，會(huì)導(dǎo)致質(zhì)粒產(chǎn)量大大降低。本產(chǎn)品對(duì)本公

司的柱式質(zhì)粒提取試劑盒進(jìn)行優(yōu)化而得，它采用了改良的細(xì)菌裂解和質(zhì)粒DNA上柱

條件，確保大型的質(zhì)粒（大至100 Kb的質(zhì)粒）能有效地結(jié)合到硅膠柱中，并可高效

地洗脫出來(lái)。其流程如下：

 


1. 適用于不超過(guò)100 Kb的大型質(zhì)粒DNA，包括BAC、PAC、P1和Cosmid 等。

如果超過(guò)100 Kb，建議使用沉淀法或離子交換法。

2. 可從1.5-5.0 mL 細(xì)菌培養(yǎng)液中純化1 μg左右大型質(zhì)粒DNA。

3. 安全，無(wú)酚氯仿等危險(xiǎn)的有機(jī)物抽提。

4. 柱式操作，比經(jīng)典的沉淀法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，每次都能獲得理想效果。

5. 得到的DNA更純凈，可以直接用于PCR、酶切和測(cè)序，不需要再純化。

6. 超值，性?xún)r(jià)比高。

使用及效果

在1.5 mL離心管收集1-5 mL過(guò)夜培養(yǎng)飽和菌液，離心1分鐘，用0.2 mL溶液A

重懸沉淀，再與0.2 mL溶液B混勻，再加入0.4 mL溶液C，混勻，室溫靜止2分鐘，

離心10分鐘，將上清轉(zhuǎn)移到DNA純化柱中，靜置2分鐘，離心1分鐘，棄收集管中

的廢液，加入0.5 mL的通用洗柱液，離心1分鐘，棄廢液，重復(fù)上一步1次。離心1

分鐘，甩干殘留液體，將DNA純化柱置于新的1.5 mL離心管（自備）中，加入50

μL DNA洗脫液保溫2分鐘，離心1分鐘，管底即得BAC質(zhì)粒DNA。
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