本試劑盒是用于革氏陽性細菌(G+)質粒DNA小量制備與純化的試劑盒。G+菌 |
體先經堿裂解法處理,再通過離心吸附柱,專一結合DNA,最后洗去雜質,高效快 |
速提取質粒DNA,全套操作可以在30分鐘之內完成。其操作流程如下: |
使用本試劑盒可從1-5 mL過夜培養(yǎng)的菌液純化得到高達20 μg的高純度質粒 |
DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、轉化、測序及PCR等。 |
1. 快速、步驟少,整個操作在半個小時之內完成。 |
2. 不需要預平衡離心吸附柱。 |
3. 洗柱液即開即用,不需要額外加乙醇。 |
4. 純度高,采用本試劑盒提取的質粒OD比值在1.8-2.0之間。 |
5. 產量高,每毫升過夜培養(yǎng)的細菌可以提取到2-5 μg/mL。 |
6. 用途廣,適用于低拷貝和高拷貝質粒。 |
7. 價格低,比多數國內同類產品的價格更便宜。 |
將0.1-1.5 mL過夜培養(yǎng)的G+12000-15000 g室溫離心1分鐘后, 重懸于0.6 mL |
溶G+菌液中,顛倒混勻5-10次后放37℃保溫至少30分鐘。12000-15000 g室溫離 |
心10分鐘,小心棄上清。用和0.25 mL溶液A重懸沉淀,再與0.25 mL溶液B混勻, |
再加入0.35 mL溶液C,混勻,室溫靜止2分鐘,離心10分鐘,將上清轉移到DNA |
純化柱中,靜置2分鐘,離心1分鐘,棄收集管中的廢液,加入0.5 mL的通用洗柱 |
液,離心1分鐘,棄廢液,重復上一步1次。離心1分鐘,甩干殘留液體,將DNA純 |
化柱置于新的1.5 mL離心管(自備)中,加入適量(30—100 μL)DNA洗脫液離 |
心即得質粒DNA。 |