本產(chǎn)品是在一步裂解式質(zhì)粒DNAOUT(CAT#:70903)基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)的、能夠快速?gòu)?00 mL左右的E.coli培養(yǎng)液中取質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它只需要一種溶液即可以完成細(xì)菌裂解,并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。它比經(jīng)典的堿變性質(zhì)粒制備方法更加快捷和方便。本產(chǎn)品的主要特點(diǎn)是:
1. 快速,整個(gè)質(zhì)粒DNA提取過(guò)程只需要不到30分鐘,比傳統(tǒng)的堿變性方法快捷。
2. 超螺旋比例高,獨(dú)創(chuàng)的非堿法一步式細(xì)菌裂解技術(shù),避免了強(qiáng)堿對(duì)DNA的損害,得到的質(zhì)粒DNA切口更少。
3. DNA純度高,幾乎沒(méi)有基因組DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7-1.9 之間。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、分子克隆等實(shí)驗(yàn)。
5. 最大吸附量為600 mg DNA,具體產(chǎn)率取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)。
過(guò)程簡(jiǎn)單,重復(fù)性和穩(wěn)定性好
將100mL左右的菌液離心得到的沉淀用20 mL溶液A充分吹打混勻,轉(zhuǎn)移到離心過(guò)濾柱中,離心后用10 mL的通用預(yù)洗液和10 mL通用洗柱液各洗離心吸附柱兩次,最后用2 mL DNA洗脫液分兩次將質(zhì)粒DNA洗脫后待用。
用本產(chǎn)品從
100 mL飽和菌液中提取pUC19 質(zhì)粒DNA,最后用2 mL洗脫DNA,20 μL 上樣電泳,染料為綠如藍(lán)核酸染料。