本產(chǎn)品是在一步式質(zhì)粒DNAOUT(CAT#:70301)基礎(chǔ)上開發(fā)的、能夠從單個(gè)菌落快速提取質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它之所以能夠從單個(gè)菌落中提取到可以用常規(guī)電泳方法檢測得到的質(zhì)粒DNA是由于一步式細(xì)菌裂解技術(shù)能夠使細(xì)菌釋放出其幾乎所有的質(zhì)粒DNA。其操作流程如下:
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 不需過夜培養(yǎng)細(xì)菌就可以提取質(zhì)粒,能為研究人員節(jié)約一天的寶貴時(shí)間。
2. 快速,整個(gè)過程只需要不到十分鐘(對一個(gè)樣品而言)。
3. 一步式裂解細(xì)菌,不使用強(qiáng)堿溶液,對DNA損傷小。
4. 得到的質(zhì)粒DNA足夠1-2次電泳或酶切實(shí)驗(yàn),足夠多次PCR、測序和細(xì)菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。
適用于高拷貝、中拷貝和低拷貝質(zhì)粒。
將1個(gè)直經(jīng)為2-5 mm的菌落轉(zhuǎn)移到100 μL溶液A中,充分吹打混勻,轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,用100 μL的通用預(yù)洗液和100 μL通用洗柱液各洗一次,最后用20 μL DNA洗脫液將質(zhì)粒DNA洗脫后待用
: 用本方法從提取一個(gè)含pU C1 9 質(zhì)粒的菌落提取質(zhì)粒DNA,得到的DNA一半用于電泳(樣品A), 另一半用EcoR I限制性內(nèi)切酶線性化后再電泳(樣品B)。電泳染料為綠如藍(lán)核酸染料。