本產品是基于RiboGreen熒光染料的超靈敏RNA定量檢測試劑盒。傳統(tǒng)的RNA檢測方法,利用260nm的光吸收來測定RNA濃度,靈敏度不高(4mg/mL RNA),而且檢測結果易受核苷酸、蛋白和RNA溶液中的鹽離子影響。與傳統(tǒng)方法相比較,本產品靈敏度顯著增強,靈敏度可高達2.5 ng/mL,且RiboGreen熒光染料穩(wěn)定性更強, 不受DNA、蛋白質和鹽離子等物質的干擾。
本產品具有如下特點:
1. 適用范圍廣,可用于體外轉錄、Northern雜交分析、RT-PCR、差異顯示PCR、 S1核酸分析和RNase保護分析等實驗。
2. 超高的靈敏度,RiboGreen 熒光染料靈敏度要比EB檢測法高出200倍,比260nm檢測法高出1000倍,能為客戶節(jié)省珍貴RNA的樣品。
3. RiboGreen染料處于溶液形式時,幾乎沒有熒光特性,而當RiboGreen染料與RNA結合時,表現出較強熒光特性。RiboGreen-RNA復合物最大激發(fā)波長為500nm,最大發(fā)射波長為525nm。
4. 操作簡單,使用方便,用戶不需要額外配制溶液。只需將染料工作液添加到樣品中,等待 5 分鐘即可讀取。
5. 與大多數熒光酶標儀、熒光檢測儀器和熒光反應兼容。
使用及效果
在每個樣品中加入等體積的2×Ribo Green工作溶液(配制步驟見產品使用手冊),充分混勻,避光于室溫下孵育2-5分鐘。將孵育好的溶液加入微量比色皿,使用熒光檢測設備檢測其熒光值。根據標準曲線,得出樣品中RNA的含量。