蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 質(zhì)譜兼容, 50X) (Protease inhibitor cocktail for general use, MS-SAFE, 50X) 是一種質(zhì)譜兼容的通用型用于細(xì)胞或組織蛋白提取等的蛋白酶抑制劑混合物(0.4mM Aprotinin, 25mM Bestatin, 7.5mM E64 and 10mM Leupeptin in H2O)，并提供獨(dú)立包裝的0.05M EDTA。
本產(chǎn)品不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導(dǎo)致的質(zhì)譜峰漂移，因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可以用于質(zhì)譜(Mass Spectrometry, MS)檢測(cè)和分析，如蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)等相關(guān)研究。
細(xì)胞或組織提取物等樣品中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易導(dǎo)致提取物中的蛋白降解或去修飾，從而影響后續(xù)的蛋白檢測(cè)。因此在提取物等樣品中添加適當(dāng)?shù)牡鞍酌�、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白降解和去修飾的有效方法�?br />本產(chǎn)品為經(jīng)優(yōu)化和測(cè)試的用于常規(guī)細(xì)胞或組織蛋白提取等的蛋白酶抑制劑混合物，包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制劑、以及氨基肽酶抑制劑。
本蛋白酶抑制劑混合物含0.4mM Aprotinin, 25mM Bestatin, 7.5mM E64和10mM Leupeptin，配制在超純水中。EDTA為單獨(dú)包裝，以便選擇性使用。如用于檢測(cè)金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA。
本產(chǎn)品使用便捷，通常以1:50的比例分別把蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 質(zhì)譜兼容, 50X)和0.05M EDTA加入裂解液中，即可用于常規(guī)的細(xì)胞或組織蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。
不同類型的蛋白提取物中含有不同類型的蛋白酶。例如，哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物中通常含有高豐度的絲氨酸蛋白酶，細(xì)菌細(xì)胞提取物通常含有較多的絲氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶，哺乳動(dòng)物組織提取物中主要含有絲氨酸、半胱氨酸和金屬蛋白酶，植物提取物中常含有大量的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶，還有一些含有天冬氨酸蛋白酶。為此針對(duì)不同類型樣品的蛋白提取，提供了不同類型的蛋白酶、磷酸酶等抑制劑混合物以供選擇，具體請(qǐng)參考附表1。
本產(chǎn)品可以有效抑制常規(guī)細(xì)胞或組織提取物中的各種蛋白酶活性，如絲氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。其中Aprotinin是絲氨酸蛋白酶的競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑；Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑；E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑；Leupeptin是絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制劑；EDTA作為螯合劑是金屬蛋白酶的可逆抑制劑。各種抑制劑的具體信息請(qǐng)參考附表2。
一個(gè)包裝的本產(chǎn)品通常足夠用于50ml裂解液的配制。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| P1008-1 | 蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 質(zhì)譜兼容, 50X) | 1ml |
| P1008-2 | 0.05M EDTA, pH 8.0 | 1ml |
| — | 說(shuō)明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃保存，一年有效。
注意事項(xiàng)：
本產(chǎn)品可以適當(dāng)分裝后保存，并應(yīng)在臨使用前添加到裂解液等適當(dāng)溶液中。
本產(chǎn)品提供了獨(dú)立包裝的EDTA，可以選擇性使用。例如，后續(xù)用于檢測(cè)提取液中金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA。
本產(chǎn)品中含有的蛋白酶抑制劑對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
1. 本蛋白酶抑制劑混合物為50X的儲(chǔ)存液，使用時(shí)按照1:50的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入20μl蛋白酶抑制劑混合物)，混勻后即可使用。含有蛋白酶抑制劑混合物的裂解液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，不宜配制后凍存待后續(xù)使用。根據(jù)需要，0.05M的EDTA也按照1:50的比例加入到裂解液中。待所需的抑制劑添加完畢并混勻后，就可以開始進(jìn)行常規(guī)細(xì)胞或組織的裂解和蛋白提取。
