蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(通用型, 50X) (Protease and phosphatase inhibitor cocktail for general use, 50X) 是一種通用型用于細胞或組織蛋白提取的蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物組合。本品含有一管蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 50X) (100mM AEBSF, 15μM Aprotinin, 6.5mM Bestatin, 0.7mM E64 and 0.5mM Leupeptin in DMSO)以及一管磷酸酶抑制劑混合物(50X) (250mM sodium fluoride, 50mM sodium pyrophosphate, 50mM β-glycerophosphate and 100mM sodium orthovanadate in H2O)，并提供獨立包裝的0.05M EDTA。
細胞或組織提取物等樣品中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易導致提取物中的蛋白降解或去修飾，從而影響后續(xù)的蛋白檢測。因此在提取物等樣品中添加適當?shù)牡鞍酌�、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白降解和去修飾的有效方法�?br />本產(chǎn)品為經(jīng)優(yōu)化和測試的用于常規(guī)細胞或組織蛋白提取等的蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物，包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制劑/氨基肽酶抑制劑，以及絲氨酸/蘇氨酸、酪氨酸、酸性及堿性磷酸酶抑制劑。
本蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物含100mM AEBSF, 15μM Aprotinin, 6.5mM Bestatin, 0.7mM E64, 0.5mM Leupeptin,
250mM sodium fluoride, 50mM sodium pyrophosphate, 50mM β-glycerophosphate, 50mM sodium orthovanadate，分別配制在高純度DMSO和超純水中。EDTA為單獨包裝，以便選擇性使用。如用于檢測金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA。
本產(chǎn)品使用便捷，通常以1:50的比例分別把蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 50X)，磷酸酶抑制劑混合物(50X)和0.05M EDTA加入裂解液中，即可用于常規(guī)的細胞或組織蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。
不同類型的蛋白提取物中含有不同類型的蛋白酶。例如，哺乳動物細胞提取物中通常含有高豐度的絲氨酸蛋白酶，細菌細胞提取物通常含有較多的絲氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶，哺乳動物組織提取物中主要含有絲氨酸、半胱氨酸和金屬蛋白酶，植物提取物中常含有大量的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶，還有一些含有天冬氨酸蛋白酶。為此針對不同類型樣品的蛋白提取，提供了不同類型的蛋白酶、磷酸酶等抑制劑混合物以供選擇，具體請參考附表1。
本產(chǎn)品可以有效抑制常規(guī)的細胞或組織提取物中的各種蛋白酶(如絲氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等)和磷酸酶(如絲氨酸/蘇氨酸、酪氨酸、酸性及堿性磷酸酶等)。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨酸蛋白酶不可逆抑制劑，其抑制常數(shù)與PMSF和DFP的抑制常數(shù)相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作為PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩(wěn)定性更好。Aprotinin是絲氨酸蛋白酶的競爭性可逆抑制劑；Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑；E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑；Leupeptin是絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制劑；Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制劑；EDTA作為螯合劑是金屬蛋白酶的可逆抑制劑；氟化鈉(sodium fluoride)是酸性磷酸酶可逆抑制劑；焦磷酸鈉(sodium pyrophosphate)是絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶不可逆抑制劑；β-甘油磷酸(β-glycerophosphate)是絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶可逆抑制劑；正釩酸鈉(sodium orthovanadate)是堿性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶可逆抑制劑。各種抑制劑的具體信息請參考附表2。
一個包裝的本產(chǎn)品通常足夠用于100ml裂解液的配制。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| P1045-1 | 蛋白酶抑制劑混合物(通用型, 50X) | 2ml |
| P1045-2 | 磷酸酶抑制劑混合物(50X) | 2ml |
| P1045-3 | 0.05M EDTA, pH 8.0 | 2ml |
| — | 說明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃保存，一年有效。
注意事項：
本產(chǎn)品可以適當分裝后保存，并應在臨使用前添加到裂解液等適當溶液中。
本產(chǎn)品提供了獨立包裝的EDTA，可以選擇性使用。例如，后續(xù)用于檢測提取液中金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA。
本產(chǎn)品中含有的蛋白酶和磷酸酶抑制劑對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 本蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物為50X的儲存液，使用時按照1:50的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入20μl蛋白酶抑制劑混合物以及20μl磷酸酶抑制劑混合物)，混勻后即可使用。含有蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物的裂解液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，不宜配制后凍存待后續(xù)使用。根據(jù)需要，0.05M的EDTA也按照1:50的比例加入到裂解液中。待所需的抑制劑添加完畢并混勻后，就可以開始進行常規(guī)的細胞或組織的裂解和蛋白提取。
