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PCR產(chǎn)物純化試劑盒

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 試劑盒內(nèi)容及保存:

試劑盒組成

RTP2202-01

50次)

RTP2202-02

100次)

貯存方式

結(jié)合液PB

50 ml

100 ml

室溫

3 M NaAc pH5.2

500μl

500μl

室溫

漂洗液PW

15 ml

2×15 ml

室溫

洗脫緩沖液EB

15 ml

15 ml

室溫

吸附柱CA2

50

100

室溫

收集管(2 ml

50

100

室溫

說明書

1

1

 

 

儲存條件:

本試劑盒在室溫(15–25℃)干燥條件下,可保存12個月;更長時間的保存可置于2–8℃。(注意:當(dāng)?shù)蜏刭A存時,使用前應(yīng)先將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫中放置一段時間,必要時可在37℃水浴中預(yù)熱10-20分鐘,以平衡溶液溫度。)

 

產(chǎn)品簡介:

本試劑盒采用離心吸附柱結(jié)合獨特的緩沖液系統(tǒng),從酶切、PCR等反應(yīng)溶液中純化DNA片段,同時除去蛋白質(zhì)、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒可回收100bp–10kbDNA片段,回收率大于80%<100 bp >10kb DNA片段回收率為3050 %)。

每個吸附柱每次最多可吸附的DNA量約為10 μg

使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實驗。

 

產(chǎn)品特點:

結(jié)合液PB為亮黃色,便于觀察體系的pH是否合適。

操作快捷,單個樣品操作少于10分鐘。

 

操作步驟:

如非指出,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

PCR反應(yīng)液中直接加入5倍體積的PB液,顛倒混勻后,全部加入到吸附柱CA2中,10,000g離心30-60秒,到掉收集管中的廢液,將吸附柱CA2重新放入收集管中。

注:● 如果PCR反應(yīng)體系使用了石蠟油,無需去除,但要使用10倍體積的PB液。

 如果反應(yīng)體系小于50μl,用水補至50μl體系,再加入PB液。

 如果體系體積大于700μl,請分次上柱,保證全部溶液均加入到吸附柱中。

向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),10,000g離心30-60秒,倒掉廢液,將吸附柱重新放入收集管中。

向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW10,000g離心30-60秒,倒掉廢液。

將離心吸附柱CA2放回收集管中,10,000g離心2分鐘,盡量除去漂洗液。

注意:此步必不可少!如果漂洗液有殘留,將會影響回收效率和DNA質(zhì)量,進(jìn)而影響下游實驗;離心后將吸附柱蓋子打開,室溫放置2分鐘,這樣將有助于徹底揮發(fā)殘余乙醇。

將吸附柱放到一個干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液EB,室溫放置2分鐘。10,000g離心2分鐘收集DNA溶液。

注意:

● 可將洗脫緩沖液EB預(yù)熱到60-70后再加到吸附膜上,這樣可以提高洗脫效率。

● CA2柱的洗脫體積不應(yīng)少于20 μl,體積過小將會降低回收效率。

● 洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率

6 DNA產(chǎn)物-20℃保存。

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