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細(xì)菌蛋白提取試劑盒

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產(chǎn)品說明:
由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶的研究。本品僅用于科研。
產(chǎn)品內(nèi)容:
操作方法:
1、細(xì)菌可溶性蛋白的提取
1) 在 1ml 的冷裂解液中各加入 10ul 的蛋白酶抑制劑和 PMSF;混勻,放置在冰 上備用;
2) 將菌體濕重稱重,然后按照比例(1g:10ml)加入的新配置的裂解液,混勻, 過程注意冰上操作;
3) 將混勻液移入超聲儀中,超聲,
超聲條件:總時(shí)間 45min,超聲時(shí)間 3s,間隔時(shí)間 3s,過程為冰浴環(huán)境;
超聲結(jié)束,4 度離心,10000rpm/min 20min;
2、吸取上清至新的管中,進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
(提取好的蛋白建議保存于-80℃,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
2. PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因?yàn)?PMSF 在水溶液中會(huì)快速降解; 
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