蛋白質(zhì)含量測定法,是生物化學(xué)研究中常用、最基本的分析方法之一。蛋白質(zhì)分子具有-NH3+基團,當(dāng)棕紅色的考馬斯亮蘭顯色劑加入蛋白標(biāo)準(zhǔn)液或樣品中時,考馬斯亮蘭染料上的陰離子與蛋白-NH3+結(jié)合,使溶液變?yōu)樗{(lán)色,通過測定吸光度可計算出蛋白含量。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、靈敏度高:測定范圍為0.2-1.3mg/ml比Lowry法約高四倍。這是因為蛋白質(zhì)與染料結(jié)合后產(chǎn)生得到顏色變化很大,蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物有更高的消光系數(shù),因而光吸收值隨蛋白質(zhì)濃度得到變化比Lowry法要大的多
2、操作簡便:單試劑操作,20分鐘可以完成50例以上樣本的測定。
3、由于染料與蛋白質(zhì)結(jié)合過程,大約只要2分鐘即可完成,其顏色可以在1小時內(nèi)保持穩(wěn)定,因而完全不用像 Lowry法那樣費時和嚴(yán)格地控制時間。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效,呈色穩(wěn)定好.
5、再現(xiàn)性好:批內(nèi)CV=103%,批間CV=5.34%。
6、回收試驗:X =101.8%。
7、受外界影響因素。焊蓴_物質(zhì)少。如干擾Lowry法的K+、Na+、Mg+、Tris緩沖液、蔗糖、甘油、巰基乙醇、EDTA等均不干擾此測定方法
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為595nm)
2、漩渦混勻器
3、微量移液器