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一氧化氮(NO)測定試劑盒(酶法)比色法

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 NO化學(xué)性質(zhì)活潑,體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化為硝酸鹽(NO3¯)和亞硝酸鹽(NO2¯),血清(NO3¯)與(NO2¯)濃度之和(NO3¯┼NO2¯)才能準(zhǔn)確代表體內(nèi)(NO)水平。血清(NO3¯┼NO2¯)含量測定,國內(nèi)有的單位采用金屬鎘還原法,但該法操作繁瑣(血清需除蛋白),反應(yīng)不易控制(金屬鎘可將NO2¯進(jìn)一步還原),且不能完全將NO3¯還原為 NO2¯,準(zhǔn)確性差。
  本測試法為一種靈敏、簡便、快速、穩(wěn)定、易推廣的方法。
  NO化學(xué)性質(zhì)活潑,在體內(nèi)代謝很快轉(zhuǎn)為NO2¯和NO3¯,而NO2¯又進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為NO3¯,本法利用硝酸還原酶特異性將NO3¯還原為NO2¯,通過顯色深淺測定其濃度的高低。

 

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡便:全程約2小時,可測100例以上樣本。
2、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效。
3、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
4、回收試驗: X =103.3%。
5、受外界影響因素。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
6、測試面廣:可測動物血液、組織、細(xì)胞、各種培養(yǎng)細(xì)胞、腦脊液、胸水、腹水、尿液、胃液、植物組織以及各種水產(chǎn)效果均佳。

所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、漩渦混勻器
4、臺式離心機(jī)
5、微量移液器

樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

操作流程:
1、按步驟加入樣本和R1、R2混合試劑,37℃水浴60分鐘
2、加入R3、R4,抽提室溫靜置40分鐘,3500~4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘

3、取上清0.5 ml,加入顯色劑,靜置10分鐘,550nm波長,0.5cm光徑,比色所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、漩渦混勻器
4、臺式離心機(jī)
5、微量移液器

樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

操作流程:
1、按步驟加入樣本和R1、R2混合試劑,37℃水浴60分鐘
2、加入R3、R4,抽提室溫靜置40分鐘,3500~4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘
3、取上清0.5 ml,加入顯色劑,靜置10分鐘,550nm波長,0.5cm光徑,比色

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