轉(zhuǎn)氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之間氨基轉(zhuǎn)換反應(yīng)的一組酶,天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)主要存在于心肌、骨骼肌、肝臟,以心肌含量最高,肝臟次之,AST能夠催化天門冬氨酸和a-酮戊二酸的氨基轉(zhuǎn)移作用,形成谷氨酸和草酰乙酸。
天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測(cè)試劑盒(賴氏微板法)其檢測(cè)原理是AST催化天門冬氨酸與α-酮戊二酸之間的氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng),其反應(yīng)公式如下:
L-天門冬氨酸+α-酮戊二酸→草酰乙酸+L-谷氨酸
二硝基苯肼與α-酮酸反應(yīng)生成相應(yīng)的二硝基苯腙,在堿性條件下二硝基苯腙的吸收光譜有差異,通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)在500-520nm處差異最大,以等摩爾濃度計(jì)算出丙酮酸的生成量,進(jìn)而計(jì)算酶的活性。
100T該檢測(cè)試劑盒可檢測(cè)50個(gè)樣品(不含標(biāo)準(zhǔn)品),該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
參考范圍:成年健康人血清AST:8~28卡門單位/ml
注意事項(xiàng):
1、二硝基苯肼顯色液溶解以后,如果仍然有結(jié)晶析出,應(yīng)棄用。
2、AST顯色基液(5×)有一定腐蝕性,請(qǐng)小心操作。
3、AST Assay buffer使用前應(yīng)37C提前孵育5min.
4、由于賴氏法的特點(diǎn),在繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)每個(gè)點(diǎn)最好做3孔的重復(fù)測(cè)定,求出各標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度均值,減去"0”號(hào)管吸光度均值后,對(duì)照賴氏單位繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5、血清中AST活性在室溫可以保存2天,4℃保存1周,-20°℃保存1個(gè)月。
6、成批樣本測(cè)定時(shí),一般無(wú)需每份樣本都做自身血清對(duì)照,以試劑空白代替即可。
7、對(duì)于超過(guò)正常范圍的血清樣本,應(yīng)該進(jìn)行復(fù)測(cè),復(fù)測(cè)時(shí)每份樣本都應(yīng)做自身血清對(duì)照。
8、嚴(yán)重黃疸、脂血或溶血的血清,可能會(huì)引起測(cè)定孔的吸光度增高,因此檢測(cè)該類樣本時(shí)應(yīng)做自身血清標(biāo)本對(duì)照。
9、當(dāng)樣本的酶活力大于190卡門單位時(shí),應(yīng)將樣本進(jìn)行5~10倍稀釋后再行測(cè)定。
10、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
11、試劑開封后請(qǐng)盡快使用,以防影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。
有效期:6個(gè)月有效。低溫運(yùn)輸,按要求保存。