XL1-blue感受態(tài)細胞說明書
【規(guī)格型號】
產(chǎn)品貨號:YS001
產(chǎn)品名稱:XL1-blue感受態(tài)細胞 10× 100ul
【產(chǎn)品說明】
本公司生產(chǎn)的XL1-bluc化學感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,可用于DNA的化學轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒DNA檢測,轉(zhuǎn)化效率高達 107cfu/μg DNA。
【基因型】
endAl gyrA96 thi-1 recAl relA1 lac glnV44F'
[::Tn10 proAB+ laclq A(lacZ)M15]hsdR17(rk -,mk+)
【產(chǎn)品特點】
該菌株用以T7 RNA 聚合酶為表達系統(tǒng)的高效外源基因的蛋白表達宿主。用于表達非毒性蛋白。
【保存條件及有效期】
-70℃保存24個月。
【操作方法】
1,取一支感受態(tài)冰浴融化,加入目的 DNA(質(zhì);蜻B接產(chǎn)物),輕輕混勻,在冰浴中放置30分鐘。
2,42℃水浴中熱激90秒,然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中2分鐘,該過程不要搖動離心管。
3,向每個離心管中加入500 u1無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃,200轉(zhuǎn)每分鐘培養(yǎng)1小時,使細菌復蘇。
4,根據(jù)實驗要求(質(zhì)粒,重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化),吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞加到含相應抗生,素的SOB或LB瓊脂培養(yǎng)基上,將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平板,37℃過夜培養(yǎng)。
【注意事項】
1,剛剛化凍的細胞,轉(zhuǎn)化效率最高。
2,避免反復化凍。
3,避免移液槍吹吸。
4,整個操作過程要輕柔。