国产商清国产精品国产k_囯产亚州中文字幕日韩在线_国产福在线永久视频_欧美日有码视频√_天天躁夜夜躁狠狠久久kk_日韩中文字幕精品在线观看_毛片a级三毛片免费播放_亚州精品中文字幕乱码三区_国产在线电影一区_国产AV青青大帝

您好,歡迎光臨上海雅吉生物商城!
工作時間:9:00-18:00
全國服務熱線:021-34661276

Stbl3感受態(tài)細胞

訂購數(shù)量:
規(guī)格
價格庫存
訂購熱線:021-34661276
我要詢價
  • 商品詳情
  • 售后服務
  • 相關文獻
Stbl3 菌株來源于 HB101 E. coli strain,是慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株;蚪M含有重組酶 recA13 突變,可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重組,降低錯誤重組的概率;但不含核酸酶 endA1 突變, 體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時務必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液。此菌株具有鏈霉素抗性,不存lacIqZΔM15,不可用于藍、白斑篩選。Stbl3 感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng) pUC19 檢測轉(zhuǎn)化效率 >108cfu/μg DNA。 
操作說明
    1.Stbl3 感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中), 加入目的 DNA(質(zhì);蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打 EP 管底輕輕混勻,冰上靜置 25 分鐘。
    2.42℃水浴熱激 45 秒,迅速放回冰上并靜置 2 分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
    3.向離心管中加入 0.9 mL 室溫 S.O.C. 培養(yǎng)基或 LB 培養(yǎng)基(推薦使用 SOC 培養(yǎng)基,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
    4.30℃,225 rpm 復蘇 90 分鐘。 (當質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時, 30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化 control PUC19 計算轉(zhuǎn)化效率,則需 37℃, 225 rpm 復蘇 60 分鐘。
    5.5000rpm 離心一分鐘收菌,留取 100μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的 S.O.C. 培養(yǎng)基上。
    6.將平板倒置放于 30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。(若轉(zhuǎn)化 control PUC19 計算轉(zhuǎn)化效率,則需 37℃培養(yǎng)過夜
    注意事項
    1.對不穩(wěn)定 DNA 片段的克隆或逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒載體的構建,涂板后平板應在 30℃培養(yǎng),以減少發(fā)生
    錯誤重組的概率。
    2.制備高純度病毒質(zhì)粒時,應使用新鮮轉(zhuǎn)化的平板接菌,新鮮菌液提取質(zhì)粒,菌液不可低溫保存后使用。
    3.對不穩(wěn)定的克隆或病毒質(zhì)粒優(yōu)先以質(zhì)粒狀態(tài)保存,盡量避免將質(zhì)粒保存在大腸桿菌細胞中。
    4.S.O.C.LB 培養(yǎng)基均可使用,S.O.C.可提高轉(zhuǎn)化效率 20%;實驗人員可選擇在 37℃或 30℃培養(yǎng)細胞,
    37℃條件下,菌生長速度加快,有利于提高質(zhì)粒產(chǎn)量,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組概率。
    5.感受態(tài)細胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中 8 分鐘內(nèi)加入目標 DNA,不可在冰中放置時間過長,長時
    間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。混入目的 DNA 時應輕柔操作。
    6.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì);蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。 
我要詢價
*聯(lián)系方式:
(可以是QQ、MSN、電子郵箱、電話等,您的聯(lián)系方式不會被公開)
*內(nèi)容:


微信客服
掃一掃立即咨詢


微信客服
掃一掃立即咨詢

銷售電話:

021-34661275

021-34661276

15301693058