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EPI400 電擊感受態(tài)細(xì)胞

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  • 介紹: 基 因 型F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr簡(jiǎn) 要 說(shuō) 明TG1來(lái)源于E. coli K-12菌株,是目前生長(zhǎng)速度最快的克隆用大腸桿菌菌株,在平板上37℃,7h可見(jiàn)克隆。主要的噬菌體展示用菌株,同時(shí)也可用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn);但不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)推薦使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內(nèi)大量的核酸酶。High5TM系列TG1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。
  • 操 作 說(shuō) 明
  • 1.EPI400感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì);蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
  • 2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
  • 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
  • 4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
  • 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
  • 注 意 事 項(xiàng)
  • 1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。
  • 2. 混入質(zhì);蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
  • 3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì);蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
  • 儲(chǔ)存條件: -80℃
  • 用途: 克隆感受態(tài)細(xì)胞
  • 注意:部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息,我司不保證所提供信息的權(quán)威性,僅供客戶參考交流研究之用。
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