大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基是改良的培養(yǎng)基,用于食品、病人糞便樣品中O157:H7菌的快速檢測。O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結(jié)果,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。
成份(g/L)
CT添加劑 1ml/支*5(已配套,無需另購)
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。
用法
稱取本品 17.2g 加入 200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱 2 分鐘左右。冷卻至 45-50℃ 時,加入一支CT添加劑混勻,傾入無菌平皿。
注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時。
操作步驟
1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
2、取 25 克樣品液加入 225ml mEC肉湯或mTSB肉湯中,36℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時;
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上,做 2 個平板;
4、36℃ 培養(yǎng) 18-24h,O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色;
5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗和全套生化試驗。
注:必須在 36℃ 培養(yǎng) 24 小時內(nèi)判讀結(jié)果,以免菌落顏色發(fā)生變化。
質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈灰白色。制備好的平板呈藍(lán)色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養(yǎng) 18-24h 小時:
注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時。
操作步驟
1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
2、取 25 克樣品液加入 225ml mEC肉湯或mTSB肉湯中,36℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時;
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上,做 2 個平板;
4、36℃ 培養(yǎng) 18-24h,O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色;
5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗和全套生化試驗。
注:必須在 36℃ 培養(yǎng) 24 小時內(nèi)判讀結(jié)果,以免菌落顏色發(fā)生變化。
質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈灰白色。制備好的平板呈藍(lán)色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養(yǎng) 18-24h 小時:
方法的局限性
本培養(yǎng)基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學(xué)試驗或生化試驗。
典型特征
典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色;
本培養(yǎng)基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學(xué)試驗或生化試驗。
典型特征
典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色;
貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
制備好的平板可保存 2-5 天,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
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