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李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基

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 用途:用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng),單增李斯特氏菌顯藍(lán)色,外圍有一不透明環(huán)

李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基可快速檢測食品和藥品中單增李斯特氏菌。陰性結(jié)果可在 天內(nèi)檢測完成。單增李斯特氏菌顯藍(lán)色,菌落周圍有一不透明環(huán)。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑制除李氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。

成份 (g/L)

基礎(chǔ)培養(yǎng)基:

營養(yǎng)物質(zhì) 70.0
顯色劑 1.0
pH 7.2 ± 0.2 25 ℃

李斯特氏菌添加劑 6.0g

李斯特氏菌抑菌劑 1 1ml*5 支

李斯特氏菌抑菌劑 2 1ml*5 支

此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。

注意

此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。

用法

稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動(dòng),使其乳化均勻,將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時(shí),把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養(yǎng)基的厚度約為 5mm ,這樣有利觀察不透明環(huán)。

貯存

制備好的固體平板保存于 2-8 ℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃

失效

干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

操作步驟

使用前,把制備好的培養(yǎng)基放置室溫 10-20 分鐘。

1 、按 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 GB 標(biāo)準(zhǔn)、 FDA 標(biāo)準(zhǔn)、 ISO 標(biāo)準(zhǔn)或其它標(biāo)準(zhǔn)制備樣品液;
2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養(yǎng) 48 小時(shí);或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混勻, 30 ℃培養(yǎng) 24 小時(shí)。
3 、取一環(huán)增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上, 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。

質(zhì)量控制

1 、外觀

此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養(yǎng)基。

2 、微生物試驗(yàn)

在 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí):

質(zhì)控菌株 ATCC 生長情況 菌落顏色 不透明環(huán)
單增李斯特氏菌 27853 +++ 藍(lán)色 +
綿羊李斯特氏菌   +++ 藍(lán)色 +
西爾李斯特氏菌   +++ 藍(lán)色 -
金黃色葡萄球菌 25923 ++ 黃色 -
大腸桿菌 25922 - - -
沙門氏菌   - - -

典型特征

單增李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 24-28 小時(shí), 平板上出現(xiàn)藍(lán)色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 48 小時(shí) ,平板上出現(xiàn)藍(lán)色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí), 平板上出現(xiàn)藍(lán)色菌落,菌落周圍沒有不透明環(huán)。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。

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