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即用型高效免疫組化二抗試劑盒

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 包裝:5ml(可用于50張片子)

適用:一抗來(lái)源于小鼠或兔子

顯色底物:DAB (聯(lián)苯二胺)

試劑組成:

組分編號(hào) 組分名稱 規(guī)格 數(shù)量
A 過(guò)氧化氫 5ml 1
B 超級(jí)封閉液 5ml 1
C 一抗放大劑 5ml 1
D 酶標(biāo)二抗聚合物 5ml 1
E DAB A液 5ml 1
F DAB B液 160ul 1

 未提供但必需試劑:一抗(來(lái)源于小鼠或兔子)、PBS (磷酸鹽緩沖液)

本試劑盒是基于聚合物技術(shù)的最新一代免疫組化二抗非生物素檢測(cè)系統(tǒng),信號(hào)更強(qiáng)、操作更加簡(jiǎn)單。 與傳統(tǒng)的免疫組化二抗試劑盒相比,具有3個(gè)特點(diǎn):一是由于聚合物的獨(dú)到之處,使得酶分子與二抗IgG分子直接結(jié)合形成的多聚物分子高度敏感性,有效減少了一抗使用量,一抗試劑可再稀釋2-4倍;二是由于避免了生物素的使用,從而可以避免由于生物素引起的非特異性背景顯色,得到更清晰的顯色和更干凈的背景;三是快速,更短的試劑孵育時(shí)間。

儲(chǔ)存及有效期

2-8°C保存。每個(gè)組分至少可以保存18個(gè)月。

操作步驟:

說(shuō)明:所有的步驟在室溫下操作,加試劑可以直接滴瓶滴定,也可以用移液器,一滴=30-40ul

1. 脫蠟、水化組織切片

2. PBS洗2-3次各5分鐘

3. 根據(jù)所應(yīng)用的一抗的特殊要求,對(duì)組織切片進(jìn)行預(yù)處理

4. PBS洗2-3次各5分鐘

5. 加入100ul A 液孵育十分鐘,阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,以減少非特異性背景染色

6. PBS洗2-3次各5分鐘

7. 加入100ul B 液孵育五分鐘來(lái)減少非特異性染色。注意:此步驟不要超過(guò)十分鐘;如果一抗在含有5%至10%正常山羊血清的緩沖液中稀釋,則此步驟可以省略

8. PBS洗2-3次各5分鐘

9. 加一抗,室溫或37℃孵育20分鐘

10. PBS洗2-3次各5分鐘

11. 加入100ul C 液孵育十分鐘

12. PBS洗2-3次各5分鐘

13. 加入100ul D 液孵育十分鐘.注意:此液對(duì)光敏感,注意避光

14. PBS洗2-3次各5分鐘

15. 配制新鮮底物液:將30ul的 F 液和1ml的 E 液充分混合,即配制成新鮮底物液(該底物液可存放2周)

16. 加入100ul新鮮底物液, 孵育五分鐘

17. 去離子水沖洗

18. 復(fù)染,封片

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