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pBM21快速克隆試劑盒

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pBM21快速克隆試劑盒為一種陽性選擇克隆系統(tǒng),克隆區(qū)域位于pBM21質(zhì)粒的**基因(lethal gene)內(nèi)部。當連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌后,有外源片段的插入的重組質(zhì)粒導(dǎo)致載體上的**基因功能喪失,細菌存活,無片段連接(載體自連)時,**基因表達的毒蛋白使細菌不能存活。該試劑盒利用T4 DNA 連接酶(T4 DNA ligase)的連接活性將平末端DN**段克隆到具有磷酸化末端的線性化載體pBM21中。
    適用于克隆由Pfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5等高保真DNA聚合酶擴增的平末端PCR產(chǎn)物或各種方法產(chǎn)生的平末端雙鏈DN**段。由Taq、Tth和klenTaq等DNA聚合酶擴增的非平末端PCR產(chǎn)物,可通過平末端化酶(Blunting Enzyme)處理成為平末端DNA用于連接。陽性克隆可以用試劑盒提供的引物PBM21F和PBM21R進行菌落PCR或測序鑒定。
產(chǎn)品特點:
1、連接反應(yīng)僅需5-30分鐘;
2、適用于平末端PCR產(chǎn)物和平末端雙鏈DN**段;
3、適用于磷酸化或非磷酸化的DN**段;
4、pBM21為氨芐抗性,具高拷貝復(fù)制起始子。
產(chǎn)品信息:

組分 數(shù)量20T 數(shù)量20T×3
pBM21 Vector (40ng/ul ) 20ul 20ul×3
2×T4 DNA ligase master mix 100ul 100ul×3
Blunting Enzyme 20ul 20ul×3
Control Insert 5ul 5ul
PBM21F Primer 0.1OD 0.1OD ×3
PBM21R Primer 0.1OD 0.1OD ×3
 
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