細(xì)胞名稱
145-2C11(倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞(產(chǎn)生CD3單抗))
別名
145-2C11
生長特性
懸浮
傳代方法
1:2傳代
傳代情況
2~3天換液
培 養(yǎng) 基
IMDM+10%FBS
培養(yǎng)體系
溫度：37℃ ， 氣相：95%空氣 ，5%CO2
細(xì)胞背景
用BM10-37小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）克隆（抗H-2kb）免疫動物。脾細(xì)胞與Sp2/0-Ag14骨髓瘤細(xì)胞融合。
凍存條件
完全培養(yǎng)基50%+40%FBS+10%DMSO，液氮
種：遷徙倉鼠（B細(xì)胞）；小家鼠（骨髓瘤）、倉鼠、亞美尼亞倉鼠（B細(xì)胞）；小鼠（骨髓瘤）
組織：脾臟，血液
我們強(qiáng)烈建議購買完全的培養(yǎng)基。
凍存介質(zhì)：90%FBS+10%DMSO
表達(dá)基因：免疫球蛋白；單克隆抗體；抗小鼠CD3
細(xì)胞產(chǎn)物：免疫球蛋白；單克隆抗體；抗小鼠CD3
注釋：應(yīng)用程序
它與所有成熟的T細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，并能激活和抑制T細(xì)胞功能。該抗體對抗原特異性T細(xì)胞受體的25000道爾頓蛋白質(zhì)組分（CD3ε）具有特異性�？贵w與小鼠T細(xì)胞受體（CD3-T3）復(fù)合物反應(yīng)。
這種抗體不會與大鼠、兔子、小型豬或倉鼠的外周血淋巴細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)。
它與所有成熟的T細(xì)胞反應(yīng)，并能激活和抑制T細(xì)胞功能.應(yīng)用
它與所有成熟的T細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，并能激活和抑制T細(xì)胞功能。該抗體對抗原特異性T細(xì)胞受體的25000道爾頓蛋白質(zhì)組分（CD3ε）具有特異性�？贵w與小鼠T細(xì)胞受體（CD3-T3）復(fù)合物反應(yīng)。
細(xì)胞收到后處理：
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)淖詈棉k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松）
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
