注意：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
土壤無機(jī)磷 （soil inorganic phosphorus，S-PHOS）含量試劑盒測定意義：
磷是植物必需大量元素。植物主要通過根系從土壤中獲取磷元素。土壤磷包括有機(jī)磷和無機(jī)磷。土壤有機(jī)磷經(jīng)過礦化分解而轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷，才能進(jìn)一步被植物吸收利用。
測定原理：
從土壤中提取無機(jī)磷，在酸性環(huán)境中，通過鉬藍(lán)法定磷，即可計(jì)算出無機(jī)磷含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋，分析天平、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水和100目篩子。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋10倍后再用。
試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入20 mL蒸餾水，充分溶解后加入10mL試劑二，混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，20μmol/L 無機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
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取10 mL離心管，加入精確稱取的100目篩子過篩的風(fēng)干土樣約0.1g，加入10mL提取液，震蕩混勻，然后置于 40℃水浴浸提 1 h，8000g，25℃，離心 10min，取 上清液，待測。
測定步驟：
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到660nm，蒸餾水調(diào)零。
2.打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3.空白管：取EP管，依次加入500μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫
10min，室溫冷卻10min 后于660nm測定吸光度，記為A空白管。
4.標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于
40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min 后于660nm 測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5.測定管：取EP管，依次加入50μL上清液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于
40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻10 min 后于660nm 測定吸光度，記為A測定管。
需在 40min 內(nèi)完成比色。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
土壤無機(jī)磷含量計(jì)算公式：
S-PHOS（nmol/d/g）= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V 總÷W= 200×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：20μmol/L；V 總：總上清液體積，10mL=0.01L；W：土壤樣品質(zhì)量，g。
注意事項(xiàng)：
1. 試劑三需臨用前配制，限當(dāng)天使用。試劑三配制過程中，可能會(huì)產(chǎn)生黑色固體，其不影
響結(jié)果，注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入。
2. 40min 內(nèi)完成比色。
