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土壤全鐵試劑盒可見分光光度法

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 注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

土壤全鐵試劑盒可見分光光度法測定意義

鐵元素是一種十分重要的植物營養(yǎng)元素,土壤中鐵含量直接影響著植物吸收利用以及生長代謝。

測定原理

pH2-9范圍內(nèi),鹽酸羥胺將三價鐵轉化為二價鐵,與鄰菲羅琳反應生成橙紅色配合物,在510nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿。

試劑組成和配制

提取劑:粉劑×1 瓶,4℃保存。

提取液:液體 100mL×2 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。

樣本處理

新鮮土樣風干,過100目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取劑質(zhì)量(g)為 1:4 的比例(建議稱取約0.1g土樣,加入0.4g提取劑)緩慢加入提取劑于坩堝中,邊加邊攪拌均勻,然后在馬弗爐中550℃熔融10min,然后在920℃熔融30min,趁熱取出坩堝,將熔融物轉入燒杯,邊攪拌邊加4mL提取液,必要時加蓋,防止溶液濺出,溶解30min 后,5000g ,25℃離心10min,取上清液待測。

測定操作表

 

空白管

測定管

樣本(μL)

 

100

試劑一(μL)

100

100

試劑二(μL)

300

300

試劑三(μL)

200

200

H2O(μL)

400

300

充分混勻,25℃靜置 20min

于1mL玻璃比色皿,蒸餾水調(diào)零,測定510nm處吸光值 A,分別記為A空白管和A測定管,

△A=A測定管-A空白管

 

計算公式

標準曲線:y=0.1569x -0.0173,R2=0.9992

全鐵含量(mg/kg)=(△A+0.0173)÷ 0.1569×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)

= 254.94×(△A+0.0173)÷W

V 反總:反應總體積,1mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.1mL;V 樣總:加入提取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g

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