注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
土壤有效硼測試盒測定意義
土壤中有效硼直接影響著植物的吸收和利用。
測定原理
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物，在 420nm 有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板。
試劑組成和配制
試劑一：液體 1mL×1 支，4℃保存。
試劑二：液體 8mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 4mL 蒸餾水溶解。
樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干，過 100 目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為 1：2 的比例（建議
稱取約 0.5g 土樣，加入 1mL 蒸餾水）加入蒸餾水，沸水中浸提 10min，待自然冷卻，加入
50μ L 試劑一，震蕩 5min，8000g ，25℃離心 10min，取上清液待測。
測定操作表
空白管 測定管
樣本（μL） 40
試劑二（μL） 80 80
試劑三（μL） 40 40
H2O（μL） 80 40
充分混勻，25℃黑暗中靜置 1h
于微量石英比色皿/96 孔板，蒸餾水調(diào)零，測定 420nm 處吸光值 A，分別記為 A 空白
管和 A 測定管，△A=A 測定管-A 空白管
計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.3897x - 0.2359，R² = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.3897×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）
= 51.32×（△A+0.2359）÷W
V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.04mL；V 樣總：加入提
取液體積，4mL，W：樣本質(zhì)量，g
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.1949x - 0.2359，R² = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.1949×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）
=102.64×（△A+0.2359）÷W
V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.04mL；V 樣總：加入提
取液體積，4mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項
1. 配制好的試劑二 4℃保存不可超過 7 天。
2. 顯色時嚴(yán)格控制溫度并且避光，以免顯色劑見光分解。
