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植物根系活力檢測(cè)試劑盒(萘胺比色法)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介∶

植物根系是活躍的吸收器官和合成器官,根的生長(zhǎng)情況和代謝水平即根系活力直接影響植物地上部的生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)狀況以及最終產(chǎn)量,是植物生長(zhǎng)的重要生理指標(biāo)之一。植物根系活力(根系脫氫酶活性)可以采用TTC還原、萘胺氧化和甲烯藍(lán)吸附等方法測(cè)定。根系能氧化萘胺生成紅色的萘胺化合物,根系對(duì)萘胺的氧化能力與其呼吸強(qiáng)度有密切聯(lián)系。

植物根系活力檢測(cè)試劑盒(萘胺比色法)檢測(cè)原理是在弱酸性條件下,以萘胺為底物,萘胺與對(duì)氨基苯磺酸、亞硝酸鹽作用生成穩(wěn)定的紅色偶氮化合物,可以根據(jù)根系表面著色深淺,通過分光光度計(jì)510nm檢測(cè)溶液中未被氧化的萘胺的量,以定量測(cè)定根系活力。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料∶

1、蒸餾水

2、電子天平、計(jì)時(shí)器

3、濾紙、離心管或試管

4、恒溫箱或水浴鍋

5、比色杯、分光光度計(jì)

操作步驟(僅供參考)∶

1、配制萘胺標(biāo)準(zhǔn)(50ug/ml):按萘胺標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml)∶蒸餾水=1∶99混合,即為萘胺標(biāo)準(zhǔn)(50ug/ml); 4℃保存,1個(gè)月內(nèi)有效。

2、配制根系A(chǔ)ssay Buffer工作液∶按萘胺標(biāo)準(zhǔn)(50ug/ml)∶根系A(chǔ)ssay Buffer =1:1混合,即為根系A(chǔ)ssay Buffer工作液,即配即用,不宜久置。

4、準(zhǔn)備樣品和對(duì)照︰

①樣品管︰取0.2~0.5g植物須根系,洗凈,用濾紙吸干,完全浸沒于15ml根系A(chǔ)ssayBuffer 工作液,室溫靜置5min,浸泡液即為待測(cè)樣品。注意∶植物根系活力與培養(yǎng)時(shí)間、酸堿、重金屬、高溫、低溫等條件均有關(guān)系,在缺陷培養(yǎng)、堿性、重金屬、高溫情況下,根系活力會(huì)有不同程度的下降。

②對(duì)照管︰加入4ml根系A(chǔ)ssay Buffer 工作液(不加根),室溫靜置5min。③第一次取樣后,將兩管25℃避光孵育60min后第二次取樣。

5、加樣∶按照下表設(shè)置空白管、對(duì)照管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡;如果樣品中的根系活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置﹖平行管,求平均值。

6、測(cè)定∶
①將系列標(biāo)準(zhǔn)管室溫靜置20min,比色杯光徑1cm,以空白管調(diào)零,以分光光度計(jì)測(cè)定510nm處系列標(biāo)準(zhǔn)管(1~6號(hào))吸光度;
②將對(duì)照管、測(cè)定管室溫靜置20min,,比色杯光徑1cm,以分光光度計(jì)測(cè)定510nm處對(duì)照管、測(cè)定管的吸光度(即為A對(duì)照o、A測(cè)定o);
③將第二次取樣的對(duì)照管、測(cè)定管室溫靜置20min,比色杯光徑1cm,再以分光光度計(jì)測(cè)定510nm 處對(duì)照管、測(cè)定管的吸光度(即為A對(duì)照1、A測(cè)定1)。

 

 

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