注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
植物酚類(lèi)物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
測(cè)定原理：
在堿性條件下，酚類(lèi)物質(zhì)將鎢鉬酸還原，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，在760nm處有特征吸收峰，測(cè)760nm處的吸光值，即可得樣品總酚含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：60%乙醇，自備。
試劑一：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存。
總酚提取：
將樣本烘干至恒重，粉碎，過(guò)40目篩之后，稱(chēng)取約0.1g，加入2.5mL提取液，60℃振蕩提取2h。10000g，25℃，離心10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待測(cè)。
測(cè)定操作表：
|
| 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
| 樣本待測(cè)液（µL） | 50 | 50 |
| 試劑一（µL） |
| 250 |
| 混勻，25℃靜置2min | ||
| 試劑二（µL） | 250 | 250 |
| H2O（µL） | 700 | 450 |
| 混勻，25℃靜置10 min，對(duì)照管調(diào)零，1mL比色皿，測(cè)定A760。 | ||
總酚含量計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 5.615x+0.0012，R2 = 0.9994
總酚含量（mg/g 干重）=（A760-0.0012）÷5.615×V樣÷(V樣÷V樣總×W)
= 0.445×（A760– 0.0012 ）÷W
V樣總：加入提取液體積，2.5mL； V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.05mL； W：樣品質(zhì)量，g
