產(chǎn)品簡介：
免疫熒光標記技術(shù)（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位，檢測出抗原或抗體。該技術(shù)的主要特點是：特異性強、敏感性高、速度快。
熒光素標記抗體簡稱熒光抗體（FA），是目前廣泛用于免疫病理、細胞化學、流式細胞學、病毒學及自身抗體的臨床免疫診斷之中的特異、靈敏、定性和定位相結(jié)合的免疫化學試劑。用于標記的抗體，要求是高特異性和高親和力的。所用抗血清中不應(yīng)含有針對標本中正常組織的抗體。一般需經(jīng)純化提取 IgG、IgM 后再作標記。
本試劑盒中的熒光素采用高質(zhì)量進口的異硫氰酸熒光素（FITC），F(xiàn)ITC 標記抗體的原理是利用FITC上的N=C=S 基團和抗體上游離的-NH2 發(fā)生化學形成 FITC-抗體結(jié)合物，即熒光抗體。一般一個IgG分子可結(jié)合2-8個分子的FITC。
產(chǎn)品組成：
| 名稱 | 包裝規(guī)格 |
| FITC | 1 支（避光） |
| 調(diào)整緩沖液 | 50ul |
| DMSO | 150ul |
| 純化柱 | 2支 |
| 收集管 | 2個 |
產(chǎn)品規(guī)格：標記100ug-1mg抗體
標記操作步驟：
1． 抗體準備
1.1． 建議抗體濃度在 1-2mg/ml 之間。
1.2． 抗體中不要含有 BSA 或其它蛋白質(zhì)成分。
1.3． 抗體緩沖液中不要含有氨基的鹽（如：Tris，NaN3等），pH在6.5-8.5為宜。
2. 抗體標記
2.1． 取出FITC離心數(shù)秒，將管中FITC干粉甩至管底；
2.2． 管中加入50ul DMSO用移液槍反復吹打或 vortex 混勻至 FITC 完全溶解；
2.3． 抗體中加入適量調(diào)整緩沖液（每100ul抗體中加入10ul 調(diào)整緩沖液）；
2.4． 將溶解后的 FITC 加入抗體中（每100ug抗體中加入4.0ul FITC）, 用移液槍反復吹打或 vortex 混勻。
2.5． 將抗體-FITC 混合物置水平搖床或旋轉(zhuǎn)混勻儀，在搖動狀態(tài)下室溫避光（反應(yīng)管可包裹錫箔紙）反應(yīng) 1h。
注： 如果需要較高 F/P 值，可適當延長抗體和FITC偶聯(lián)時間。
3. 游離FITC去除
3.1． 取出純化柱，將純化柱 3000rpm 離心 2min。
3.2． 暫時保留收集管中的緩沖液。
3.3． 將純化柱移至新的收集管上，吸取抗體-FITC偶聯(lián)物置純化柱中填料的表面。如果樣品體積小于50ul，應(yīng)先用3.2保留的緩沖液將液體量補足50ul。上樣體積最大不要超過100ul。
3.4． 待樣品滲入填料后，3000rpm 離心2min。
3.5． 將抗體-FITC 標記物 4℃避光保存待用，終產(chǎn)品可4℃可避光保存 1 年。
注意事項：
1. 試劑盒保存在2-8℃, 勿凍存。
2. 試劑盒組份在運輸過程中可能造成顛倒，會使液體或干粉試劑沾到管壁或瓶蓋上。使用前請離心處理，以使附著管壁或瓶蓋的液體或干粉試劑沉積到管底。
3. FITC 需現(xiàn)用現(xiàn)配，溶解后的 FITC 不能長期保存。
4. 純化柱中的緩沖液含有毒性成分疊氮化鈉（NaN3）,使用時避免與皮膚，眼睛和黏膜接觸。
5. DMSO屬微毒類，對人體皮膚有滲透性，對眼又刺激作用，使用時避免與皮膚，眼睛和黏膜接觸。
6. 標記前抗體的透析，濃縮和濃度測定等操作都會造成抗體量的損失，因此標記前準備抗體時需根據(jù)具體情況考慮最適宜的抗體量。
保存條件：2-8℃避光保存，一年有效。勿凍存。
