可滴定酸(TA)檢測(cè)試劑盒(滴定法)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
有機(jī)酸存在于多種生命體中，植物組織或果實(shí)中有機(jī)酸種類和數(shù)量因植物組織或果實(shí)種類和品種而異，進(jìn)而影響果實(shí)的口味、酸糖比、耐儲(chǔ)性，植物組織或果實(shí)中含有蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、草酸等多種有機(jī)酸。
雅吉生物可滴定酸(TA)檢測(cè)試劑盒(滴定法)又稱有機(jī)酸檢測(cè)試劑盒，檢測(cè)原理是根據(jù)酸堿中和原理進(jìn)行的，即用已知濃度的氫氧化鈉溶液滴定待測(cè)樣品,根據(jù)氫氧化鈉的消耗量計(jì)算待測(cè)樣品中可滴定酸的含量，主要用于定量檢測(cè)植物組織或果實(shí)中可滴定酸(如蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、草酸等)的含量，該50T試劑盒可以檢測(cè)約47~48次樣本。
該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成：
| 名稱 | 50T | Storage |
| 試劑(A):TA Lysis Buffer(10×) | 250ml | RT |
| 試劑(B):TA 滴定液(0.1mol/L) | 2×250ml | RT |
| 試劑(C):TA 標(biāo)定液 | 120ml | 4℃ |
| 試劑(D):酚酞指示劑 | 5ml | RT |
自備材料：
1、實(shí)驗(yàn)材料∶桃子、李子、蘋果、杏等果實(shí)或其他植物組織
2、研缽或勻漿器、濾紙或紗布
3、離心管或試管、三角瓶、滴定管、容量瓶
4、水浴鍋、離心機(jī)
5、pH計(jì)、藍(lán)色石蕊試紙
6、滴定分析用蒸餾水(無(wú)CO2，無(wú) NH3 )
操作步驟(僅供參考)：
1、配制TA Lysis Buffer工作液：取適量的TA Lysis Buffer(10×)，
按TA Lysis Buffer(10×)︰蒸餾水=1∶9的比例混合，即為TA Lysis Buffer工作液。
2、準(zhǔn)備樣品︰取果實(shí)或其他植物組織，洗凈，擦干，稱取剪碎的新鮮樣品5g，置于研缽或勻漿器，加入10ml TA Lysis Buffer 工作液，充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入三角瓶，用少量TA Lysis Buffer工作液沖洗研缽或勻漿器，一并轉(zhuǎn)入三角瓶，補(bǔ)加TA Lysis Buffer工作液約30ml ,混勻，(置于80℃恒溫水浴鍋)靜置浸提30min，期間攪拌數(shù)次。(冷卻后)用濾紙或紗布過(guò)濾(也可4000r/min離心10min),留取濾液(或上清液)轉(zhuǎn)入50ml容量瓶中，用TA Lysis Buffer 工作液沖洗殘?jiān)?~3次，合并濾液并定容至50ml，充分混勻，即為可滴定酸提取液，4℃保存待用。
3、標(biāo)定TA滴定液：取20ml TA標(biāo)定液，滴加5OμL酚酞指示劑，用TA滴定液(0.1 mol/L)滴定至溶液呈粉紅色；按如下公式計(jì)算TA滴定液準(zhǔn)確濃度:
TA滴定液準(zhǔn)確濃度(nb ,mol/L)=0.24/(TA滴定液所用毫升數(shù)×0.2042)
4、滴定測(cè)定∶取10ml可滴定酸提取液加至三角瓶，滴加50μL酚酞指示劑，用已經(jīng)標(biāo)定好的TA滴定液進(jìn)行滴定至溶液初現(xiàn)粉紅色并在0.5min內(nèi)不褪色為終點(diǎn)，記錄TA滴定液的用量；以TA Lysis Buffer工作液代替可滴定酸提取液進(jìn)行滴定，作為空白對(duì)照。
計(jì)算︰
根據(jù)TA滴定液消耗量，計(jì)算樣品中可滴定酸含量，以百分比表示。
計(jì)算公式如下∶
可滴定酸含量(%)={V×nb×f×(V1-V0)×100%}/(W×VS)
100g 樣品鮮重中可滴定酸含量(g/100g)={V×nb×f×(V1-V0)×100}/(W×VS)
式中:
V=樣品提取液的總體積(ml)
nb=標(biāo)定后的TA滴定液摩爾濃度(mol/L= mmol/mL)
V1=滴定提取液所用的TA滴定液的體積(ml)
V0=滴定蒸餾水所用的TA滴定液的體積(ml)
W=樣品鮮重(g)
VS=滴定時(shí)所取濾液(可滴定酸提取液)的體積(ml)，
本實(shí)驗(yàn)中VS=10ml
f=折算系數(shù)(1mmol TA滴定液換算為有機(jī)酸克數(shù)的系數(shù)，g/mmol)
