產(chǎn)品簡介:
λ噬菌體是早使用的克隆載體,其基因組是長度約為50kb的雙鏈DNA分子,其在宿主細(xì)胞由兩種生活途徑:1、裂解生長:環(huán)狀DNA分子在細(xì)胞內(nèi)多次復(fù)制,合成大量噬菌體基因產(chǎn)物,裝配成噬菌體顆粒,裂解宿主菌再進(jìn)行下一次感染;2、溶源性生長:感染細(xì)胞內(nèi)λ噬菌體DNA整合到宿主菌染色體DNA中與之一起復(fù)制,并遺傳給子代細(xì)胞,宿主細(xì)胞不裂解。科研人員常常利用λ噬菌體裂解生長的特點(diǎn),培養(yǎng)獲取大量的λ噬菌體顆粒,并提取λ噬菌體DNA。噬菌體載體廣泛用于文庫篩選,目的克隆培養(yǎng)獲得大量的噬菌體顆粒需要提取λ噬菌體DNA來開展測序等后續(xù)工作。λ噬菌體裂解培養(yǎng)物離心后的上清, 首先用RNase A /DNaseⅠ混合酶消化去除殘留的宿主菌DNA/RNA,沉淀收集噬菌體,通過酚異戊醇等提取,殘留碎片通過沉淀離心去除,通過一系列快速的漂洗、離心的步驟,將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,獲得DNA的量很高,但是純度一般,但是足夠用于大多數(shù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。