Rosetta(DE3)甘油菌，是收集生長(zhǎng)在對(duì)數(shù)期的Rosetta(DE3)菌，加入含有甘油的細(xì)菌凍存液制備而成。可以直接劃平板或小量、大量培養(yǎng)。本菌株適用于T7啟動(dòng)子(T7 promoter)調(diào)控目的基因表達(dá)的pET系列等原核表達(dá)質(zhì)粒，特別適合帶有真核基因特異性的稀有密碼子的真核基因在大腸桿菌中的IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，能有效提高真核基因的蛋白表達(dá)水平。
BL21缺失細(xì)胞質(zhì)中的Lon蛋白酶(Lon protease)和胞外膜上的OmpT蛋白酶(OmpT protease)，能有效避免重組表達(dá)蛋白的降解，所以被廣泛用作外源蛋白的表達(dá)菌株。
BL21(DE3)是BL21被λ噬菌體DE3溶原化(lysogenization)的衍生菌株，在lacUV5啟動(dòng)子控制下可表達(dá)噬菌體T7 RNA聚合酶(相關(guān)基因序列已經(jīng)整合到細(xì)菌染色體中)。IPTG可以誘導(dǎo)BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的高表達(dá)，因此BL21(DE3)菌株適合受T7啟動(dòng)子(T7 promoter)調(diào)控的目的基因通過(guò)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)。常見的pET系列原核表達(dá)載體中目的基因的表達(dá)都是受T7啟動(dòng)子調(diào)控的，因此都適合用BL21(DE3)作為宿主菌。
Rosetta是大腸桿菌BL21(DE3)的衍生菌株，含有一個(gè)氯霉素抗性基因的質(zhì)粒，該質(zhì)�？赊D(zhuǎn)錄產(chǎn)生識(shí)別6種大腸桿菌的稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)的tRNA(這些tRNA是由它們天然的promoter驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的)，由此Rosetta能夠大大提高帶有真核基因特異的稀有密碼子的真核基因在大腸桿菌中的表達(dá)水平。
Rosetta(DE3)是Rosetta被λ噬菌體DE3溶原化的菌株，在lacUV5啟動(dòng)子控制下可表達(dá)噬菌體T7 RNA聚合酶，因此其適合通過(guò)IPTG誘導(dǎo)的、克隆到pET系列載體中的、帶有對(duì)于大腸桿菌而言是稀有密碼子的真核基因的表達(dá)。
Rosetta(DE3)基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB- ) gal dcm (DE3) pRARE (CamR ).
Rosetta(DE3)菌株核酸酶表達(dá)水平較高，在利用其進(jìn)行被轉(zhuǎn)化質(zhì)粒提取時(shí)，為充分避免核酸酶的影響，可使用質(zhì)粒小量抽提試劑盒(通用型) (D0007S或D0007M)、質(zhì)中量抽提試劑盒(通用型) (D0020)或質(zhì)粒大量抽提試劑盒(通用型) (D0028)進(jìn)行質(zhì)粒抽提。
本菌株可以使用常規(guī)的LB培養(yǎng)基或SOC培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| D0371 | Rosetta(DE3)甘油菌(密碼子兼容的蛋白誘導(dǎo)表達(dá)) | 200μl |
| — | 說(shuō)明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃保存，一年有效。-80℃可以長(zhǎng)期保存。
注意事項(xiàng)：
使用本甘油菌時(shí)可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。在沒有結(jié)凍的情況下，菌體會(huì)逐漸沉淀至管底，請(qǐng)務(wù)必注意適當(dāng)混勻后使用。
為保證菌種純正，避免其它細(xì)菌污染，盡量先劃平板然后再挑單克隆菌落進(jìn)行后續(xù)操作。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
