NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運檢測試劑盒(NF-κB Activation，Nuclear Translocation Assay Kit)是通過免疫熒光染色檢測NF-κB的主要亞基p65是否轉(zhuǎn)運到細胞核內(nèi)從而確認NF-κB是否被激活的檢測試劑盒。本試劑盒中的NF-κB p65抗體可以識別人、小鼠或大鼠的NF-κB p65亞基，因此本試劑盒可以檢測人、小鼠或大鼠細胞或組織中的NF-κB核轉(zhuǎn)運激活。
本試劑盒提供了固定液、洗滌液、封閉液、一抗、熒光標記二抗、細胞核熒光染色液、封片液，使用時不必再配制其它任何溶液。提供了細胞核熒光染色液，可以把細胞核染成藍色熒光，這樣可以清楚地判斷NF-κB是否被轉(zhuǎn)運到細胞核內(nèi)而被激活。使用本試劑盒檢測細胞中NF-κB核轉(zhuǎn)運激活的效果參考圖1。
圖1. NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運檢測試劑盒(兔多抗)用于檢測HEK293細胞中NF-κB核轉(zhuǎn)運激活的效果圖。正常情況下的HEK293細胞中，p65蛋白分布在細胞漿中(圖B, D)；在一定濃度的TNF-α刺激下，NF-κB被激活，大多數(shù)p65轉(zhuǎn)運至細胞核內(nèi)(圖F, H)。圖中藍色熒光為細胞核染色液(DAPI)的染色效果。實際染色效果會因?qū)嶒灄l件、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中效果僅供參考。
兩種NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運檢測試劑盒的比較請參考下表。
| 產(chǎn)品編號 | SN368 | SN371 |
| 產(chǎn)品名稱 | NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運檢測試劑盒(兔多抗) | NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運檢測試劑盒(小鼠單抗) |
| 包裝 | >50次 | >50次 |
| p65抗體類型 | 兔多抗 | 小鼠單抗 |
| 識別種屬 | 人、小鼠 | 人、小鼠、大鼠 |
| 熒光二抗 | 抗兔Cy3 (紅色熒光) | 抗小鼠Cy3 (紅色熒光) |
| 細胞核染料 | DAPI (藍色熒光) | DAPI (藍色熒光) |
| 特異性 | ★★★★★ | ★★★★★ |
| 檢測效果 | ★★★★★ | ★★★★★ |
NF-κB是一種常見的轉(zhuǎn)錄因子，可以被炎癥因子、生長因子或趨化因子等激活。常見的炎癥因子(包括Interleukin-1和TNF-α等)都可以激活NF-κB。NF-κB由兩類亞基形成同源或異源二聚體。一類亞基包括p65(也稱RelA)、RelB和C-Rel；另一類亞基包括p50和p52。最常見的NF-κB亞基組成形式為p65/p50或p65/p65。
NF-κB未被激活時和IκB-α形成一個復(fù)合物，分布在細胞漿中。在炎癥因子、生長因子或趨化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情況下，IκB-α會在Ser32和Ser36被磷酸化，隨后被泛素-蛋白酶體途徑降解。NF-κB和IκB-α解聚后，其核定位序列被暴露，從而被轉(zhuǎn)運到細胞核內(nèi)促進NF-κB依賴的基因轉(zhuǎn)錄。通過免疫染色檢測NF-κB的主要亞基p65是否被轉(zhuǎn)移到細胞核內(nèi)，就可以判斷NF-κB是否被激活。
本NF-κB激活－核轉(zhuǎn)運檢測試劑盒僅染色p65，不染色RelB、C-Rel、p50和p52。
使用本試劑盒染色后NF-κB呈紅色熒光，細胞核呈藍色熒光。
如果檢測組織切片或6孔板內(nèi)的細胞樣品，至少可以檢測50個樣品，如果檢測96孔板內(nèi)的樣品，至少可以檢測250-500個樣品。
包裝清單：
| 產(chǎn)品名稱 | 包裝 | |
| 固定液 | 50ml | |
| 洗滌液 | 250ml ×2 | |
| 免疫熒光染色封閉液 | 50ml | |
| NF-κB p65抗體 | 6ml | |
| 抗兔Cy3 | 6ml | |
| 細胞核染色液(DAPI) | 50ml | |
| 抗熒光淬滅封片液 | 10ml | |
| － | 說明書 | 1份 |
保存條件：
固定液和細胞核染色液-20℃保存，其余試劑均4℃保存，半年有效。其中抗兔Cy3和細胞核染色液需避光保存。
注意事項：
固定液對人體有害，操作時請?zhí)貏e小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
免疫熒光染色時，請注意回收使用過的NF-κB p65抗體和抗兔Cy3�；厥蘸笾辽倏梢灾貜�(fù)使用10次。
需使用可以觀察紅色熒光和藍色熒光的熒光顯微鏡。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
