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人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述


肝竇內(nèi)皮細(xì)胞是肝臟非實質(zhì)細(xì)胞中數(shù)目最多的細(xì)胞,約占肝非實質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的70%,在表型、功能上與普通毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有較大差異。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞之間缺乏細(xì)胞間連接,細(xì)胞下基底膜物質(zhì)很少,因此竇內(nèi)皮通透性較高,有利于調(diào)節(jié)物質(zhì)交換。

不同于肝細(xì)胞的自我復(fù)制,肝再生時新生LSECs主要來自肝內(nèi)外其他細(xì)胞成分的分化替代,不少研究證實了肝再生時LSECs的骨髓源性替代。內(nèi)皮祖細(xì)胞是參與這一過程的主要細(xì)胞成分。

窗孔是肝竇內(nèi)皮細(xì)胞最具特征性的結(jié)構(gòu),從<10nm至1~2μm不等,生理條件下由于窗孔結(jié)構(gòu)的存在和缺乏內(nèi)皮下完整基膜的結(jié)構(gòu),由肝竇內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成的肝竇壁是全身毛細(xì)血管壁中唯一缺乏基膜的毛細(xì)血管,除竇內(nèi)的血細(xì)胞外,血漿成分均能從窗孔進(jìn)入Disse間隙,進(jìn)行物質(zhì)交換。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶TERT基因。

細(xì)胞特性

1) 細(xì)胞來源于人正常肝組織。

2) 細(xì)胞鑒定:血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

產(chǎn)品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
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