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人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述

癌組織由實質(zhì)和間質(zhì)兩部分構(gòu)成,癌細(xì)胞構(gòu)成癌實質(zhì),是癌的主要成分,具有組織來源特異性,癌間質(zhì)一般由結(jié)締組織和血管組成,起支持和營養(yǎng)癌實質(zhì)的作用,不具有特異性。

當(dāng)實體瘤超過1-2mm時,需要通過新生的血管和活化的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞來獲取癌細(xì)胞生長和增殖所必須的營養(yǎng)物質(zhì)。其中,癌相關(guān)成纖維細(xì)胞可通過分泌多種細(xì)胞因子和生長因子來發(fā)揮促進(jìn)癌血管生成的作用。

上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)是一種胚胎發(fā)育期的表型轉(zhuǎn)化,在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中也能觀察到相似的EMT過程。而由上皮和間質(zhì)相互作用所形成的腫瘤-宿主界面微環(huán)境的平衡狀態(tài)直接決定腫瘤的發(fā)生發(fā)展。多種因素可影響該界面,其中癌相關(guān)成纖維細(xì)胞是數(shù)量最豐富的基質(zhì)細(xì)胞,在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞EMT過程中發(fā)揮重要作用。它通過細(xì)胞與細(xì)胞間相互接觸及分泌各種細(xì)胞因子、蛋白酶類等,促進(jìn)上皮細(xì)胞及其細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化,并對界面各組分產(chǎn)生重要的調(diào)控作用。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項:  收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1) 細(xì)胞來源于人手術(shù)胰腺癌組織。

2) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

3) 細(xì)胞生長方式:長梭形,貼壁培養(yǎng)。

產(chǎn)品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1) 1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系作為體外培養(yǎng)人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)基。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

4℃、避光

原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗(青霉素/鏈霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

產(chǎn)品使用

1) 本產(chǎn)品僅能用于科研

2) 本產(chǎn)品未通過直接用于活體動物和人的審核

3) 本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核

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